Konzipierung, Aufbau und Charakterisierung eines integrierten mikrofluidischen Systems für die in vitro-Immunzellaktivierung und Untersuchung der immunoregulierenden Funktion von Milch

微流体分析方法[j] .中国科学院学报（自然科学版）gesundheitsfördernderEin längerfristiges Ziel ist die Entwicklung von milchproduckten mit gesundheitsfördernden Eigenschaften。Konkret soll在植物体内的研究：体外系统研究；单酶- zellen （THP-1）、脂多糖（LPS）和乳脂- zellen的反应；单酶-巨噬细胞- zellen （THP-1）的反应；(1) Zellwachstum和Stimulation； (2) zytokin - magnetk<e:1> gelchen和mischen mitden zellin in iner Inkubations-/“Brutkammer”；(3)zytokin - magnetkgelchen和Waschen der zytokin - magnetkgelchen和(4)die Zytokin-Quantifizierung。在微流体系统中，最佳的方法是鉴别单酶-巨噬细胞- LPS刺激下的单酶-巨噬细胞-刺激反应。产奶的。In jder Einheit werden die Monozyten In einer eigenen Inkubationskammer kultiviert。Nach der industrizierten differendiung der Monozyten zu Makrophagen in der ersten Kammer和der monoschichtausbilung beden bebeder Kammer和LPS der vorverdter Milch behandelt。在悬浮液中以无差异形式存在的单质酵母。Eine悬浮液的功能性isierten magnetkgelchen风在die Inkubationskammer transportiter中，其中die freigesetzine Zytokine和Monozyten和Monozyten- makrophagen eingeleitet werden。Dann wird der Komplex aus magnetkgelchen und Zytokinen " magnetisch gewaschen ", um ungebundene Proteine zu entferen。Die magnenetkugel - zytokin - complex werden schließlich in der Detektionskammer magneticgefangen and mittelels荧光显微法。

Das Projektziel ist die Identifizierung gesundheitsfördernder Bestandteile von Milch mittels mikrofluidischer Analysemethoden. Ein längerfristiges Ziel ist die Entwicklung von Milchprodukten mit gesundheitsfördernden Eigenschaften. Konkret soll in der geplanten Studie ein In-vitro-System zur Untersuchung der entzündlichen Reaktion von Monozyten-Zellen (THP-1) auf Lipopolysaccharid (LPS) und Milch entwickelt werden, ihre Reaktion mit der von Monozyten-Makrophagen verglichen und die Sekretion dreier verschiedener Zytokine (TNF-α, IL-1b, IL-6) quantifiziert werden. Dazu ist ein integriertes Mikrofluidiksystem zu entwickeln, das aus vier funktionellen Einheiten besteht und die Ausführung vierer aufeinander folgender Schritte in einem einzigen Kanal erlaubt: (1) Zellwachstum und Stimulation, (2) Inkubation von Zytokin-Magnetkügelchen und mischen mit den Zellen in einer Inkubations-/“Brutkammer“, (3) Waschen der Zytokin-Magnetkügelchen und (4) die Zytokin-Quantifizierung.Ein Grundelement des mikrofluidischen Systems besteht aus zwei identischen Einheiten für die parallele Untersuchung der Reaktion der Monozyten und der Monozyten-Makrophagen-Stimulation mit LPS bzw. Milch. In jeder Einheit werden die Monozyten in einer eigenen Inkubationskammer kultiviert. Nach der induzierten Differenzierung der Monozyten zu Makrophagen in der ersten Kammer und der Monoschichtausbildung werden beide Kammern mit LPS oder vorverdauter Milch behandelt. Die Monozyten in der zweiten Kammer verbleiben in undifferenzierter Form in der Suspension. Eine Suspension mit funktionalisierten Magnetkügelchen wird in die Inkubationskammer transportiert, wo die freigesetzten Zytokine aus Monozyten und Monozyten-Makrophagen eingeleitet werden. Dann wird der Komplex aus Magnetkügelchen und Zytokinen „magnetisch gewaschen“, um ungebundene Proteine zu entfernen. Die Magnetkugel-Zytokin-Komplexe werden schließlich in der Detektionskammer magnetisch gefangen und mittels Fluoreszenzmikroskopie erfasst.