Structure and binding specificities of the VWC domains of Chordin and Chordin-like 2

Willebrand因素C Domäne，也包括半胱氨酸-reiche Chordin（CR）Domäne bezeichnet，通常在与其他蛋白质的组合中，在一个大的Zahl中，在胚胎发育过程中发挥重要作用。VWFC Domäne在60 Aminosäuren auf的Regel中获得了一个Größe。具有CXXCXC/CCXXC的半胱氨酸具有蛋白质结构的特征。Viele Proteine，与VWFC Domänen共同作用于BMP/TGF-β信号转导。Die direkten Interaktionspartner sind häufig Liganden der TGF-β Superfamilie，z.B. TGF-β s或BMP。最后一个问题是，大众FC的Domänen和他的合作伙伴也被认为是扭曲的胃和和弦。所有这些都是国际化的特点，而这一时代的特点是一个VWFC家族的结构，它是由前胶原A2的Willebrand因子C家族的结构所决定的。该生物制剂的结构并不明确，但VWFC Domäne von Procollagen A2的生物活性并不高，与BMP-2的结合韦尔登密切相关。通过对VWFC Domänen von Cvl 2的Zebrafisch的鉴定和特性，该生物制剂项目得以快速进行。该绑定seigenschaften和-spezifitäten sollen mittels Mutagenese and Interaktionsstudien untersucht韦尔登. VWFC Domäne 1与BMP-2自由结合的Lösungsstruktur soll mit Hilfe der Kernresonanzspektroskopie，VWFC Domäne 1与BMP-2结合的复合体的结构使Röntgenbeugung aufgeklärt韦尔登。通过一项致突变研究将功能性结合增强，从而使结构发生变化。在Cvl 2上与VWFC Domänen进行的交互中，Chordin得到了韦尔登的支持。VWFC Domänen中的突变，导致BMP-2或Chordin führen的结合，导致Zebrafisch Cvl 2韦尔登的mRNA中的锚定。Mit Hilfe von mRNA-Mikroinjektionsexperimenten sollen die Ausculturekungen der veränderten BMP-2 bzw. Chordin-Bindung的VFWC-Mutanten可以使胚胎发育韦尔登。VWFC Domänen Cvl 2的结构和BMP-2的相互作用以及其他BMP-调节蛋白的相互作用可使韦尔登的吸收增加。Die Kenntnis der Wirkweise der VWFC Domänen von Cvl2 sind für das Verständnis der Wirkweise anderer BMP-Modulatorproteine der VWFC Familie von großer Bedeutung.

Die von Willebrand Faktor C Domäne, auch ¿Cystein-reiche Chordin (CR) Domäne bezeichnet, tritt einzeln oder in mehrfacher Kopie - oft in Kombination mit anderen Proteindomänen - in einer großen Zahl von sekretierten Proteinen auf, die eine wichtige Rolle während der Embryonalentwicklung spielen. Die VWFC Domäne weist in der Regel eine Größe von 60 Aminosäuren auf. Zehn Cysteine mit einer CXXCXC/CCXXC Consensussequenz stellen das Charakteristikum dieser Proteindomäne dar. Viele Proteine, mit VWFC Domänen wirken als extrazelluläre Modulatoren der BMP/TGF-ß Signaltransduktion. Die direkten Interaktionspartner sind häufig Liganden der TGF-ß Superfamilie, z.B. TGF-ßs oder BMPs. Neueste Ergebnisse zeigen jedoch, dass VWFC Domänen auch andere Partner binden können, beispielsweise Twisted Gastrulation und Chordin. Allerdings sind diese Interaktionen bisher nur unzureichend charakterisiert.Bis zu diesem Zeitpunkt ist lediglich die Struktur einer einzigen VWFC Domäne, der Struktur der Von Willebrand Faktor C Domäne von Procollagen A2 aufgeklärt und publiziert. Die biologische Aussagekraft dieser Struktur ist allerdings unklar, da der VWFC Domäne von Procollagen A2 bisher keinerlei biologische Aktivität, in Bezug auf Bindung von BMP-2 zugeordnet werden konnte.Das hier vorgeschlagene Projekt befasst sich mit der Identifizierung und Charakterisierung der fünf VWFC Domänen von Cvl2 aus Zebrafisch. Die Bindungseigenschaften und -spezifitäten sollen mittels Mutagenese und Interaktionsstudien untersucht werden. Die Lösungsstruktur der freien BMP-2 bindenden VWFC Domäne 1 soll mit Hilfe der Kernresonanzspektroskopie, die Struktur des binären Komplexes der VWFC Domäne 1 und BMP-2 mittels Röntgenbeugung aufgeklärt werden. Die Strukturaufklärung wird zudem durch eine Mutagenesestudie ergänzt um die funktionellen Bindungsepitope aufzuklären. Außerdem soll die Interaktion der verschiedenen VWFC Domänen von Cvl2 mit Chordin näher untersucht werden. Mutationen in den VWFC Domänen, die zu einer Änderung der Bindungseigenschaften an BMP-2 oder Chordin führen, sollen anschließend in mRNA von Zebrafisch Cvl2 überführt werden. Mit Hilfe von mRNA-Mikroinjektionsexperimenten sollen die Auswirkungen der veränderten BMP-2 bzw. Chordin-Bindung dieser VFWC-Mutanten während der Embryonalentwicklung untersucht werden. Die hier vorgeschlagenen Versuche werden dazu beitragen, die Struktur der VWFC Domänen von Cvl2 und deren Interaktion mit BMP-2 und weiteren BMP-Modulatorproteinen aufzuklären. Die Kenntnis der Wirkweise der VWFC Domänen von Cvl2 sind für das Verständnis der Wirkweise anderer BMP-Modulatorproteine der VWFC Familie von großer Bedeutung.