Multi-frequency EPR studies of the structure and dynamics of site directed spin labeled colicin A and synthesized Ras

Zeitabhängige Konformationsfluktuationen sind unmittelbar mit den biologischen Funktionen von Proteinen verknüpft.这种动力学的功能仅仅是部分理解。Die Methode der ortsspezifischen Spinmarkierung ermöglicht die detaillierte orts- und zeitaufgelöste Untersuchung der Struktur und Dynamik von Proteinmutanten mittels der Elektronenspinresonanz（EPR）-Spektroskopie.在未来的项目中，将采用高性能-EPR-Spektroskopie混合韦尔登来实现Spinmarkierung的特殊性能。本文解决了（i）用韦尔登的结构确定齿轮的动力学参数，（ii）利用齿轮的动力学参数确定齿轮的蛋白质功能和齿轮韦尔登的动力学参数，（iii）用高精度塞曼齿轮-EPR方法确定齿轮韦尔登的极性，（iv）neue hochauflösende Methoden zur Bestimmung von Interspin-Abständen in mehrfach spinmarkierten Proteinen entwickelt韦尔登. Eingesetzt韦尔登als Modellproteine Bakteriorhodopsin and Colicin A，bei dem insbesondere die Faltungsvorgänge beim Eindringen in die Membran von großem Interesse sind.

Zeitabhängige Konformationsfluktuationen sind unmittelbar mit den biologischen Funktionen von Proteinen verknüpft. Diese funktionell bedeutende Dynamik ist bislang nur partiell verstanden. Die Methode der ortsspezifischen Spinmarkierung ermöglicht die detaillierte orts- und zeitaufgelöste Untersuchung der Struktur und Dynamik von Proteinmutanten mittels der Elektronenspinresonanz(EPR)-Spektroskopie. Im vorgeschlagenen Projekt soll die ortsspezifische Spinmarkierung mit der Hochfeld-EPR-Spektroskopie kombiniert werden. Im einzelnen sollen (i) die Beziehung der Seitenkettendynamik zur Struktur der Seitenkettenumgebung aufgedeckt werden, (ii) Änderungen dieser Dynamik während der Proteinfunktion und bei Faltungsvorgängen untersucht werden, (iii) unter Ausnutzung der erhöhten Zeeman-Aufspaltung der Hochfeld-EPR Methoden zur Bestimmung der Polarität in der Spinlabel-Umgebung verfeinert werden, (iv) neue hochauflösende Methoden zur Bestimmung von Interspin-Abständen in mehrfach spinmarkierten Proteinen entwickelt werden. Eingesetzt werden als Modellproteine Bakteriorhodopsin und Colicin A, bei dem insbesondere die Faltungsvorgänge beim Eindringen in die Membran von großem Interesse sind.