Fluoreszente Proben zur Echtzeitbestimmung von Lipaseaktivitäten in lebenden Zellen

在过去的二十年里，人们首次用荧光磷脂酶A2探针检测荧光共振能量转移（FRET）现象。Die Substanzen stellten gute Substrate für die seklischen Isoenzyme der Pla2 dar und zeigten nach Zugabe des Enzyms Veränderungen um den Faktor 30 im Verhältnis der Emissionsmaxima der beiden interagierenden Fluorophore.通过对PLA 2细胞溶质的生理学和药理学相关的探针底物的研究，可以对探针的合成进行研究，模拟花生四烯酸酯在两个Säureest细胞中的双重结合，并对荧光团进行分析。在膜渗透性磷酸乙醇胺bzw中使用新的磷酸化试剂可以解决问题。磷酸胆碱酯韦尔登。所有生物活性物质均为S-乙酰基硫代乙基，因此可用于韦尔登。这样的风险是由医疗机构提供的。随后，在筛选PLA 2抑制剂和延长Zellen寿命方面进行了试验。

In den ersten zwei Jahren des Projektes konnten erstmals fluoreszente Phospholipase A2-Proben hergestellt werden, deren Funktionsweise auf dem Phänomen des Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (FRET) beruht. Die Substanzen stellten gute Substrate für die sekretorischen Isoenzyme der Pla2 dar und zeigten nach Zugabe des Enzyms Veränderungen um den Faktor 30 im Verhältnis der Emissionsmaxima der beiden interagierenden Fluorophore. Um die Substrateigenschaften der Proben den physiologisch und pharmakologisch interessanteren cytosolischen PLA2 anzupassen, bedarf es nun der Synthese von Proben, die zur Simulation des Arachidonsäureesters Doppelbindungen im sn2Säurerest tragen und eine veränderte Anordnung der Fluorophore aufweisen. Ferner sollen die Proben mit neuen Phosphorylierungsreagenzien in membranpermeable Phosphoethanolamin bzw. Phosphocholindervate überführt werden. Als bioaktivierbare Schutzgruppen sollen erstmalig S-Acetylthioethylgruppen verwendet werden. Die so erhaltenen Proben werden mit Hilfe der konfokalen Fluoreszenzmikroskopie an Makrophagen untersucht. Nach erfolgreicher Erprobung können die Proben in Zukunft zum Screening von Inhibitoren der PLA2 an lebenden Zellen verwendet werden.