Enzymologie der intein-codierten homing-Endonuklease PI-SceI aus Saccharomyces cerevisiae

该基因由Klasse内含子组成。在Einer bis zu 50 Basenpaar Langen DNA-ErkennungsSequenz spalen中，有一个完整的密码子。在体内führt模具修复插入(“归位”)在ein同源物等位基因，DEM的内含子和内含子中的同源基因密码子序列。Pi-SCEI Weist neben der DNA-Spaltungsakentiität auf，MIT Deren Hilfe sie sich Aus Dem Verbund Mit der vakuolären ATPase，in Dem sie ALS Protein Vorliegt，Bfreit。I m Vordergrund unseress is Pi-SCEI stehen die Fragen，Wie Dieses Enzym eine so ungew ewöhnlich groçe DNA-Sequenz erkennt，Wie dhch die DNA-Bindung die katalytischen Ztren aktiviert Wen den and Wie die DNA-Spaltung abläuft.在这一点上，我们不能理解，因为这是一种新的、更广泛的、更广泛的基因分析和研究。

Die homing-Nuklease PI-SceI gehört zu einer neuen Klasse intron-bzw. intein-codierter hochspezifischer Endonukleasen, die die DNA in einer bis zu 50 Basenpaar langen DNA-Erkennungssequenz spalten. In vivo führt die Reparatur des Doppelstrangbruchs zur Insertion ("homing") der für die Endonuklease codierenden Sequenz in ein homologes Allel, dem dieses intron oder intein fehlt. PI-SceI weist neben der DNA-Spaltungsaktivität auch eine Protein-Spleißaktivität auf, mit deren Hilfe sie sich aus dem Verbund mit der vakuolären ATPase, in dem sie als Proprotein vorliegt, befreit. Im Vordergrund unseres Interesses am PI-SceI stehen die Fragen, wie dieses Enzym eine so ungewöhnlich große DNA-Sequenz erkennt, wie durch die DNA-Bindung die katalytischen Zentren aktiviert werden und wie die DNA-Spaltung abläuft. Unsere Untersuchungen werden dazu beitragen, eine neue Klasse von Enzymen, die wegen ihrer großen Erkennungssequenz für Genomanalyse und gezielte Genomveränderung von Bedeutung sein könnte, in ihrer Struktur, Funktion und Evolution zu verstehen.