Protein-protein and protein-lipid interactions of the ß-amyloid precursor protein during membrane trafic in neurosecretory cells

作为一种I型跨膜蛋白，b-淀粉样前体蛋白APP，将被构建成突触前转运和突触内分泌的结构性通路。在Verlauf这种转运是通过对淀粉样蛋白Ab肽进行蛋白水解的B-和g-Sekretasen。该应用程序是一个在该程序中运行的功能强大的游戏。我们的工作组正在进行两项新的实验，即蛋白质-蛋白质和蛋白质-脂质的相互作用，以研究细胞膜的相互作用。这种方法可以用来研究APP在韦尔登神经系统中的细胞内转运。因此，我们将用寡聚体和APP与膜蛋白（z.B.）相互作用进行体内交联。Preseniline，Sekretasen）im Verlauf des biosynthetischen und endozytosischen Transports untersuchen.我们将通过光亲和标记法，用胆固醇和甘油磷脂对APP的脂质进行生物合成和内酶转运。Schließlich wollen wir，in Anbetracht der Komplexität präsynaptischer Endozytose，die Kompartimente charakterisieren，in die APP internalisiert wird.

Das b-Amyloid Vorläuferprotein APP, ein Typ I Transmembranprotein, wird über den konstitutiv sekretorischen Weg zur Präsynapse transportiert und anschließend endozytiert. Im Verlauf dieses Transports wird APP durch sogenannte b- und g-Sekretasen proteolytisch zum amyloidogenen Ab Peptid prozessiert. Die das APP umgebenden Membranlipide spielen vermutlich eine wichtige Rolle bei dieser Prozessierung. Unsere Arbeitsgruppe hat jüngst zwei neue experimentelle Verfahren entwickelt, die es erlauben, Protein-Protein und Protein-Lipid Interaktionen während des Membranverkehrs in lebenden Zellen zu untersuchen. Diese Verfahren sollen nun zur Untersuchung des intrazellulären Transports von APP in neurosekretorischen Zellen angewendet werden. Erstens wollen wir mit Hilfe von in vivo Crosslinking den oligomeren Zustand von APP sowie seine Interaktion mit anderen Membranproteinen (z.B. Preseniline, Sekretasen) im Verlauf des biosynthetischen und endozytotischen Transports untersuchen. Zweitens wollen wir durch Photoaffinitäsmarkierung mit photoaktivierbarem Cholesterin und Glycerophospholipiden die Lipidumgebung von APP während des biosynthetischen und endozytotischen Transports untersuchen. Schließlich wollen wir, in Anbetracht der Komplexität präsynaptischer Endozytose, die Kompartimente charakterisieren, in die APP internalisiert wird.