Rolle eines ClpP-ähnlichen Phagenproteins bei der Entwicklung des Lactobacillus gasseri Bakteriophagen Phi adh.

ClpP-蛋白酶在Bakterien细胞质转换蛋白中具有重要作用。如果它们与ATP结合的Clp-伴侣结合，它们的蛋白水解活性就不会增加。在对加氏乳杆菌噬菌体的全基因组测序中，我们首先对一种ClpP家族的病毒进行了检测。Bisher提出了两种噬菌体蛋白（Mhp，Lys），可用于裂解ClpP-底物的韦尔登和降解ClpP-底物。噬菌体基因编码没有蛋白质，同源物可以作为Clp-伴侣。本文介绍了一种具有前瞻性的药物框架，即（i）在噬菌体生长发育过程中ClpP蛋白的功能，以及（ii）通过Clp-Chaperonen（Clp-Chaperonen）的介导，使药物进入细胞。Zur Klärung dieser Fragen sollen（i）clp-Gene des Wirtes lb. gasseri identifiziert and ebenso wie clpP von fadh gezielt deletiert韦尔登，（ii）缺失的药物对噬菌体的改造和对噬菌体蛋白亚克隆的加工的影响。gasseri untersucht韦尔登和（iii）体外功能分析，其通过韦尔登产生Clp和噬菌体蛋白。Zur Construktion der clp-Deletionen haben wir ein Genintegrationssystem für Lb.加塞里·埃布利埃特。

ClpP-Proteinasen spielen eine wichtige Rolle beim Turnover cytoplasmatischer Proteine in Bakterien. Sie entfalten ihre proteolytische Aktivität üblicherweise nur dann, wenn sie mit ATP-bindenden Clp-Chaperonen assoziiert sind. Im Zuge der Totalsequenzierung des Genomes des temperenten Lactobacillus gasseri Phagen fadh haben wir erstmals ein Mitglied der ClpPFamilie bei einem Virus nachgewiesen. Bisher sind uns zwei Proteine des Phagen (Mhp, Lys) bekannt, die proteolytisch prozessiert werden und deshalb als ClpP-Substrate in Frage kommen. Das Phagengenom codiert allerdings keine Proteine, die Homologien zu bekannten Clp-Chaperonen aufweisen. Deshalb sind die zentralen Fragen des vorliegenden Antrages (i) welche Funktionen das ClpP-artige fadh-Protein bei der Entwicklung des Phagen wahrnimmt und (ii) ob es dabei mit passenden Clp-Chaperonen des bakteriellen Wirtes zusammenwirkt. Zur Klärung dieser Fragen sollen (i) clp-Gene des Wirtes lb. gasseri identifiziert und ebenso wie clpP von fadh gezielt deletiert werden, (ii) Auswirkungen der Deletionen auf die Phagenentwicklung und auf das Processing subklonierter Phagenproteine in Lb. gasseri untersucht werden und (iii) in vitro-Funktionsanalysen mit gereinigten Clp- und Phagenproteinen durchgeführt werden. Zur Konstruktion der clp-Deletionen haben wir ein Genintegrationssystem für Lb. gasseri etabliert.