Untersuchung der Struktur und Funktion des mechanosensitiven Kanalproteins MscL in seiner natürlichen Membranumgebung mittels Festkörper-NMR an selektiv Isotopen-markierten Polypeptiden (13C, 15N, 19F) und an unmarkiertem Protein (14N in natürlicher Häufi

对机械敏感的骨髓间充质干细胞在Zell膜渗透孔中的作用进行了调节。De StrukTurn Dieses Membra Proteins im geschlossenen Zustand der孔wurde kürzlich mittels Röntgenkristallogie aufgeklärt.在此唯一的修女连指手套Festkörper-核磁共振和核磁共振结构的毛孔，嗯Daraus Schluçfolgerungen de FunktionSweise des MSCL-Proteins ableiten zu können.这是一种跨膜螺旋结构，在此基础上建立了一种跨膜螺旋结构。Mittels Festkörper-NMR Sollen lokale Abstände and Orientierungen am齐聚Bündel der多肽在Ihrer natürlichen Membrumgebung verMessen中被发现。在此基础上，提出了两种不同的解释方法：一种新的方法，一种新的解释方法。Netürlicher Häufigkeit fürlicher Häufigkeit für Strukturuntersusuhungen eingesetzt，um zuletzt das gesamte Protein untersuzen zu ku können.机制敏感通道蛋白MSCL通过在细胞膜上开孔来补偿细菌细胞内的渗透压.这种膜蛋白在闭孔状态下的结构最近通过X射线结晶学进行了解析。在这里，通过固体核磁共振研究开放孔的结构，以得出关于MSCL蛋白功能的结论。第一个目标是建立一个简化的多肽模型，该模型由穿孔衬里跨膜片段组成。为此，将测量在其自然膜环境中的寡聚肽束内的局部距离和取向。下一个目标是描述由于脂类性质的变化以及多肽的突变而导致的结构变化，并用孔洞开放的方式来解释这些变化。除了选择性的同位素标记外，还将探索利用自然丰度的14N进行结构研究，以研究整个蛋白质。

Bei der Regulation des Innendrucks von Bakterienzellen kann der mechanosensitive Kanal MscL durch Öffnen einer Pore in der Zellmembran osmotische Druckdifferenzen ausgleichen. Die Struktur dieses Membranproteins im geschlossenen Zustand der Pore wurde kürzlich mittels Röntgenkristallographie aufgeklärt. Hier soll nun mittels Festkörper-NMR die Struktur der geöffneten Pore untersucht werden, um daraus Schlußfolgerungen über die Funktionsweise des MscL-Proteins ableiten zu können. Zunächst soll ein vereinfachtes Peptidmodell, bestehend aus der Poren-auskleidenden Transmembranhelix etabliert werden. Mittels Festkörper-NMR sollen lokale Abstände und Orientierungen am oligomeren Bündel der Polypeptide in ihrer natürlichen Membranumgebung vermessen werden. Durch Änderung der Lipideigenschaften (Membrandicke, Phasenzustand), sowie durch die Verwendung von Mutanten, sollen strukturelle Unterschiede erfaßt werden und hinsichtlich einer Öffnung des Kanals interpretiert werden. Neben selektiven Isotopenmarkierungen soll hierbei erstmalig auch 14N in natürlicher Häufigkeit für Strukturuntersuchungen eingesetzt werden, um zuletzt das gesamte Protein untersuchen zu können.The mechansosensitive channel protein MscL can compensate osmotic pressure in bacterial cells by opening a pore in the cell membrane. The structure of this membrane protein in the closed state of the pore was solved recently by x-ray crystallography. Here, the structure of the open pore is investigated by solid state NMR in order to draw conclusions about the function of the MscL protein. First goal is to establish a simplified peptide model, which consists of the pore-lining transmembrane segment. To this aim, local distances and orientations within the oligomeric peptidebundle in its natural membrane environment will be measured. The nextobjective is to characterize structural changes resultingfrom a variation of the lipid properties as well as mutations of thepeptide, and interpret these in terms of a pore opening. Besides selective isotope labelling, the use of 14N at natural abundance for structural investigations will be explored in order to investigate the whole protein.