Rolle der Acetylase-Aktivität des transkriptionellen Ko-Regulators p300 in der Differenzierung

p300 list in Ko-Regulator grover ßen Zahl von transcriptionsfaktoren mit multiplen Funktionen in verschiedenen zellulären Prozessen。Wir haben durch同源基因重组在胚胎干细胞Stammzellen Mäuse中的应用研究p300 hergestellt （p300ASneo）的庞克突变。基因敲入型杂交基因<s:1> r ein vollständiges p300蛋白，基因敲入型野生型蛋白激酶Protein-Acetylase-Aktivität。多等位基因的Die Expression and vollständig underdr<e:1> ckt solange as als Selektionsmarker verwendete neo Gen in einem内含子des p300 vorlilet。该杂交基因的初步研究结果表明，该基因序列与p300-Lokus基因的同源性有关。Die Untersuchung von Mäusen， Die杂合子f<e:1> r das derprimierte p300ASlox sind，该gezeigt， dass das乙酰化酶-defiziente p300-Protein eine显性阴性Wirkung ausbt。Diese Eigenschaften erlaubenes， p300ASneo模拟einem klassischen条件杂交；p300ASneo Mäuse werden mit Mäusen gekreuzt, die die cree - rekombinase gewebsspezifisch exprimieren。表达显性负p300蛋白，如in der Folge selektiv diejenigen Prozesse blockiert， <s:2> r die Acetylase-Aktivität des p300 not enddig ist。遗传条件下，显性负列杂交和非遗传条件下的杂交，遗传酶学研究进展Aktivität des p300 in Verlauf der Differenzierung spielt。大足wollen wir in Hämatopoese和脂肪生成zwei分子Ebene gut beschrieben Differenzierungsvorgänge betrachten。

p300 ist ein Ko-Regulator einer großen Zahl von Transkriptionsfaktoren mit multiplen Funktionen in verschiedenen zellulären Prozessen. Wir haben durch homologe Rekombination in embryonalen Stammzellen Mäuse mit einer Punktmutation im p300 hergestellt (p300ASneo). Dieses Knock-in Allel kodiert für ein vollständiges p300 Protein, das im Gegensatz zum Wildtyp-Protein keine nachweisbare Protein-Acetylase-Aktivität aufweist. Die Expression des mutierten Allels wird vollständig unterdrückt solange das als Selektionsmarker verwendete neo Gen in einem Intron des p300 vorliegt. Das Allel wird dereprimiert wenn das von loxP-Sequenzen flankierte neo durch die Cre-Rekombinase aus dem p300-Lokus entfernt wird. Die Untersuchung von Mäusen, die heterozygot für das dereprimierte p300ASlox sind, hat gezeigt, dass das acetylase-defiziente p300-Protein eine dominant negative Wirkung ausübt. Diese Eigenschaften erlauben es, p300ASneo analog einem klassischen konditionellen Allel zu verwenden: p300ASneo Mäuse werden mit Mäusen gekreuzt, die die Cre-Rekombinase gewebsspezifisch exprimieren. Durch die Depression Allels ausschließlich im cre-exprimierenden Gewebe kommt es zur gewebsspezifischen Expression des dominant negativen p300 Proteins, das in der Folge selektiv diejenigen Prozesse blockiert, für die Acetylase-Aktivität des p 300 notwendig ist. Mit diesem konditionellen, dominant negativen Allel soll untersucht werden, welche Rolle die enzymatisch Aktivität des p300 im Verlauf der Differenzierung spielt. Dazu wollen wir im Hämatopoese und Adipogenese zwei auf molekularer Ebene gut beschrieben Differenzierungsvorgänge betrachten.