Role of extracellular enzymes for the development, maintenance and degradation of biofilms

在生物膜基质和聚合物底物(EPS)中，生物膜下的铜绿假单胞菌-Bedingungen Extra zelluläre酶膨胀。VerfüGBar Gewordene Genomequenz von P.铜绿假单胞菌错误的全球分析DES EPS-蛋白质组。他说：“我不知道你的名字是什么意思。”我们对超速离心法、生化和免疫学特性及电泳法进行了研究，并对结果进行了分析。Zur Klärung der Rolle Extrazellulärer Ease für Aufbau and Abbau von Biofilmen Well zwei ans‘tze gewählt：(1)Biofilme Wen MIT Enzymktmuanten angezüchtet，Dann BioChemisch and MIT Dem Konfokalen激光扫描-Mikroskop charakterisiert；(2)MIT Hilfe Enzym-Reportergen-Fusionen Well Transkrigtionelle Intro Enzymgene Untersuht。生物膜在Durchflusszellen angezüchtet和Durchflusszellen angezüchtet，Durchflusszellen en angezüchtet Durchflusszellen angezüchtet Durchflusszellen angezü

Bisher konnte gezeigt werden, dass Pseudomonas aeruginosa unter Biofilm-Bedingungen extrazelluläre Enzyme bilden und in die Biofilm-Matrix aus extrazellulären polymeren Substanzen (EPS) sekretiert. Die verfügbar gewordene Genomsequenz von P. aeruginosa erlaubt jetzt eine globale Analyse des EPS-Proteoms. Hierzu sollen die EPS-Proteine mit zweidimensionaler Elektrophorese aufgetrennt und massenspektrometrisch identifiziert werden. Die Sekretion von Enzymen in Membranvesikeln, welche durch Ultrazentrifugation isoliert, biochemisch und immunologisch charakterisiert und elektronenmikroskopisch visualisiert werden, soll ebenfalls untersucht werden. Zur Klärung der Rolle extrazellulärer Enzyme für Aufbau und Abbau von Biofilmen werden zwei Ansätze gewählt: (1) Biofilme werden mit Enzymdefektmutanten angezüchtet, dann biochemisch und mit dem konfokalen Laser-Scanning-Mikroskop charakterisiert; (2) mit Hilfe von Enzym-Reportergen-Fusionen wird die transkriptionelle Regulation der Enzymgene untersucht. Die Biofilme werden auf Agar-Nährmedien und in Durchflusszellen angezüchtet, damit die Kinetik der Bildung extrazellulärer Enzyme und der Biofilm-Bildung bestimmt werden kann.