Lysosomal proteins of sphingolipid- and membrane digestion: structure and function

Bausteine zellulärer质膜和内切内切酶在体内的膜和溶菌体，麻省理工学院DENENSIE Verdaut是。鞘氨醇脂肪醇脂是一种抗外源性氢化石蜡的药剂。膜脂蛋白(SAP，Saposine)和阴离子磷脂双(单酰甘油)磷酸(BMP)。您的位置：我也知道>教育/科学>教育/职业教育/教育/科学/教育/科学研究。在Einigen Fällen zusätzlich Auch Exohysisikasen Durch ProteinProtein-Wechselwirkungen aktivieren中，Erste biPhysikalische和酶实验Zeigen，da？Aktivator Proteine die Lipid阶段von Memmenen perturbieren and in Einigen Fällen zusätzlich auch Exohysisikasen Durch Protein-Wechselwirkungen aktivieren.分析Einzelner激活蛋白(GM2AP、SAP-A、-B、-C、-D)、外源性水解素(b-己糖胺A、B、S和葡萄糖脑苷酶)及致病原变异。Herfür在Insekten-und Hefezellen(PichiaPastoris)Präparativ expriert and rein darsterellt.De rekombinanten Ptoteine Sollen für Röntgenstrukturanalysen kristallisiert and die kleinen en Aktiatoren für核磁共振-Studien MIT IsotOpen markiert。在脂质体的酶试验中，我们用了蛋白质、蛋白质和蛋白质，用差示扫描量热仪、差示扫描量热法、薄膜凝胶电泳法、表面等离子体共振法、动力学试验法等进行了检测。

Bausteine zellulärer Plasmamembranen erreichen nach Endozytose die inneren Membranen der späten Endosomen und Lysosomen, mit denen sie verdaut werden. Sphingolipide dieser intralysosomalen Vesikel werden durch Exohydrolasen schrittweise abgebaut. Die funktionelle Wechselwirkung der wasserlöslichen Hydrolasen mit den membranständigen Lipidsubstraten wird an den Phasengrenzflächen durch membranaktive Sphingolipidaktivatorproteine (SAPs, Saposine) und anionische Phospholipide wie Bis(monoacylglycero)phosphat (BMP) ermöglicht. Erbliche Defekte einzelner Exohydrolasen und Aktivatorproteine führen zu lysosomalen, meist fatalen Speicherkrankheiten. Erste biophysikalische und enzymatische Experimente zeigen, daß Aktivatorproteine die Lipidphase von Membranen perturbieren und in einigen Fällen zusätzlich auch Exohydrolasen durch ProteinProtein-Wechselwirkungen aktivieren. Ziel der geplanten Arbeiten ist die Struktur- und Funktionsanalyse einzelner Aktivatorproteine (GM2AP, SAP-A, -B, -C, -D), Exohydrolasen (b-Hexosaminidasen A, B, S und Glucocerebrosidase) und ihrer pathogenen Varianten. Hierfür werden sie in Insekten- und Hefezellen (Pichia pastoris) präparativ exprimiert und rein dargestellt. Die rekombinanten Ptoteine sollen für Röntgenstrukturanalysen kristallisiert und die kleineren Aktivatoren für NMR-Studien mit Isotopen markiert werden. Um die molekularen Abbau-Mechanismen an der Phasengrenzfläche und die Lipid-, bzw. Enzymspezifität einzelner Aktivatorproteine besser zu verstehen, sollen ihre Spezifitäten in liposomalen Enzymtests, ihre Protein-Protein- und Protein-Lipid-Wechselwirkungen mittels Isothermaler Titrationskalorimetrie, Differential Scanning Calorimetry, Filmwaagemessungen, Surface Plasmon Resonanz und Dynamischer Lichtstreuung untersucht werden.