Untersuchungen zur Beteiligung von Polymerase (NIb) und Helikase (CI) des Plum pox virus der Pflaume (PPV) an der RNA-Rekombination

对于pflanzenviraler RNA的分离和重组是病毒RNA与RNA-聚合物（RdRp）和Helikasen的相互作用的基础。Potyviridae科的病毒在重组过程中存在，但重组机制并不完全清楚。Ziel des Projektes ist，梅痘病毒蛋白（PPV），die an der Rekombination beteiligt sind，zu identifizieren and rekombinationsaktive Bereiche zu lokalisieren。Kürzlich将PPV Hüll蛋白（CP）转基因本氏烟草（Nicotiana benthamiana Pflanzen韦尔登）中的重组突变体转化为PPV Hüll蛋白。通过转基因Pflanze和病毒全长A克隆的方法，可以在重组的基础上进行非特异性病毒突变和筛选。重组马铃薯病毒的RNA-结合RNA-聚合酶（NIb）与螺旋酶（CI）的结合效果较好。NIb和CI-Gen可引起韦尔登。CP-防御PPV的全长A克隆韦尔登中存在不规则的突变，并可使病毒增殖和生长受阻。CP-转基因N. benthamiana Pflanzen，一个重组联合体，可以影响NIb-和CI-突变对重组联合体功能的影响韦尔登。在此基础上，将CI和NIb重新组合，使其具有良好的语言和其他韦尔登。Die erhaltenen Ergebnisse sollen ein erweitertes Verständnis der an der Rekbination und diskation beteiligten Proteinbereiche des CI und NIb von Potyviren ermöglichen und Rückschlüsse zur Entwicklung der Rekbinationsfunktion als Mechanismus der Adaption und Evolution erlauben.

Für eine Replikation und Rekombination von pflanzenviraler RNA ist die Interaktion zwischen viraler RNA und RNA-abhängigenRNA-Polymerasen (RdRp) und Helikasen essentiell. Die Familie der Potyviridae ist in Bezug auf Rekombination kaum, beziehungsweise bezüglich des Rekombinationsmechanismus bisher nicht untersucht. Ziel des Projektes ist, Proteine des Plum pox virus (PPV), die an der Rekombination beteiligt sind, zu identifizieren und rekombinationsaktive Bereiche zu lokalisieren. Kürzlich konnte die Rekombination verschiedener PPV Hüllproteindefektmutanten in PPV Hüllprotein (CP) transgenen Nicotiana benthamiana Pflanzen nachgewiesen werden. Dieses System aus transgener Pflanze und viralem `full-lengthA Klon ermöglicht die Herstellung unterschiedlicher Virusmutanten und ihr Screening auf eine Beeinträchtigung der Rekombinationsfähigkeit. An der Rekombination von Potyviren sind wahrscheinlich die RNA-abhängige-RNA-Polymerase/Replikase (NIb) und die Helikase (CI) beteiligt. Das NIb- und das CI-Gen sollen zufällig mutagenisiert werden. Die unterschiedlichen Mutationen sollen in den CP-defekten PPV `full-lengthA Klon eingefügt werden, welcher Virusassemblierung und Ausbreitung verhindert. Bei Infektion von CP-transgenen N. benthamiana Pflanzen, die eine rekonstituierende Rekombination ermöglichen, kann der Einfluss der NIb- und CI-Mutationen auf die Rekombinationsfähigkeit überprüft werden. Auf diese Weise sollen rekombinationsbeteiligte CI und NIb Genbereiche lokalisiert und näher charakterisiert werden. Die erhaltenen Ergebnisse sollen ein erweitertes Verständnis der an der Rekombination und Replikation beteiligten Proteinbereiche des CI und NIb von Potyviren ermöglichen und Rückschlüsse zur Entwicklung der Rekombinationsfunktion als Mechanismus der Adaption und Evolution erlauben.