Structural mechanisms of chromatin transcription

Die zelluläre Maschinerie für die mRNA-Synthese arbeitet mit Proteinfaktoren zusammen，die transskription durch Chromatin steuern.这种“染色质转铁蛋白”对基因调控具有重要意义，包括蛋白质Spt 4/5、Spt 6、Paf-Komplex、染色质-重塑ATP酶Chdl、核小体-改变蛋白FACT、以及组蛋白-甲基转移酶Setl和Set 2。Spt 4/5和Paf-Komplex通过染色质-结构的相互作用，结合RNA聚合酶11（Pol 11），也可与Chdl、FACT和组蛋白-甲基转移酶相互作用。Mit diesem Antrag möchte ich die Struktur von Chromatin-Transkriptionsfaktoren und ihren funktionalen Komplexen aufklären.在第二个三年中，我们将（i）使用Spt 4/5的线性晶体结构和使用Pol 11的复合物，（ii）使用内源性PafKomplex的增强，使用最佳的多肽，在大规模的基础上进行纳米晶体化，（iii）使用Spt 4/5的线性复合物的Chdl和FACT变体和Rekonstitution。Von diesen Arbeiten erwarte ich strukturelle Einsichten in die Mechanismen transskriptions-gekoppelter Veränderungen der Chromatin-Struktur.

Die zelluläre Maschinerie für die mRNA-Synthese arbeitet mit Proteinfaktoren zusammen, die die Transkription durch Chromatin steuern. Diese 'ChromatinTranskriptionsfaktoren' tragen signifikant zur Genregulation bei, und umfassen die Proteine Spt4/5, Spt6, den Paf-Komplex, die Chromatin-remodellierende ATPase Chdl, das Nukeosom-alterierende Protein FACT, sowie die Histon-Methyltransferasen Setl and Set2. Spt4/5 und der Paf-Komplex koppeln die Transkription mit Veränderungen der Chromatin-Struktur, da sie sowohl RNA-Polymerase 11 (Pol 11) binden, als auch mit Chdl, FACT, und Histon-Methyltransferasen interagieren. Mit diesem Antrag möchte ich die Struktur von Chromatin-Transkriptionsfaktoren und ihren funktionalen Komplexen aufklären. In den ersten drei Jahren wollen wir (i) die Kristallstruktur von Spt4/5 alleine und im Komplex mit Pol 11 bestimmen, (ii) die Aufreinigung von endogenem PafKomplex, der aus fünf Polypeptiden besteht, in großem Maßstab für die Nanoliter-Kristallisation etablieren und (iii) lösliche Varianten von Chdl und FACT zur Kristallisation und Rekonstitution von Komplexen mit Spt4/5 erhalten. Von diesen Arbeiten erwarte ich strukturelle Einsichten in die Mechanismen Transkriptions-gekoppelter Veränderungen der Chromatin-Struktur.