Strukturanalyse der RNA-Polymerase I und eines minimalen RNA-Polymerase-Initiationskomplexes

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RNA-Polymerase (Pol) I synthetisiert die ribosomale RNA in Eukaryonten. Pol I besteht aus 14 Untereinheiten mit einem Gesamt-Molekulargewicht von 600 kDa. Es ist uns nun gelungen, die dreidimensionale Untereinheiten-Architektur der Pol I durch einen kollaborativen „Hybrid“-Ansatz mittels Kryo-Elektronen-Mikroskopie, Röntgenkristallographie, Homologie-Modellierung und biochemischer Analyse aufzuklären, um Unterschiede zur Struktur der Pol II zu kartieren (Kuhn et al., Cell, in press). Wir haben Kristalle der Pol I erhalten und wollen nun die hochaufgelöste Röntgenstruktur bestimmen. Zudem soll ein minimaler Transkriptions- Inititaionskomplex aus dem Archaeon Pyrrococcus strukturell untersucht werden; unsere Vorarbeiten sind eben publiziert worden (Kusser et al., JMB, in press). Diese Arbeiten versprechen grundlegende Einsichten in die Struktur und Funktion zentraler Enzym-Maschinerien des Zellkerns, die mechanistische Untersuchungen des Mechanismus der ribosomalen Gen-Transkription und –Regulation ermöglichen.