Genetic and biochemical characterization of SRS2 and the RecQ helicases of plants

我们在拟南芥中鉴定了RecQ DNA Helikasen的同源物，并研究了RecQ蛋白的外切酶活性。但不能确定受体拮抗剂Srs2的生物化学特性，因为受体拮抗剂是韦尔登。大北解决了蛋白质在异质系统中的作用，韦尔登。该Untersuchungen sollen die Substratspezifität bei der Entwindung ebenso klären，wie die Frage in welcher mono der oligomeren Form die Helikasen aktiv sind.随后，我们对拟南芥的插入突变进行了研究，并将其与突变后的基因组不稳定性进行了比较，结果表明，Helikasen在体内的功能与韦尔登相似。Dabei wird mit Hilfe von transgenen Testerlinien die Beteiligung der einzelner Helikasen an verticaledenen Rekombinationswegen（intrachromosomale，interchromosomale，homeologe sowie meiotische Rekombination）geprüft. Schließlich soll versucht韦尔登mittels biochemischer and genetischer Ansätze Interaktionsnetzwerke zwischen en Helikasen and anderen in DNA Rekombinationsprozesse involvierten Proteinen zu definieren，um die Rolle der einzelnen Helikasen umfassend zu charakterisieren.

Wir konnten bereits Homologe von RecQ DNA Helikasen in Arabidopsis thaliana identifizieren und die exonukleolytische Aktivität des RecQ-verwandten Proteins AtWRNexo biochemisch charakterisieren. Nun soll die biochemische Charakterisierung der RecQ Helikasen sowie der vermutlich antagonistischen Srs2 Helikase vorangetrieben werden. Dabei sollen die Proteine im heterologen Systemen exprimiert werden. Die Untersuchungen sollen die Substratspezifität bei der Entwindung ebenso klären, wie die Frage in welcher mono- oder oligomeren Form die Helikasen aktiv sind. Nachdem wir eine größere Anzahl von Insertionsmutanten von Arabidopsis isoliert und bereits erste Hinweise auf genomische Instabilitäten im mutanten Hintergrund erhalten haben, sollen parallel die Funktion der Helikasen in vivo geklärt werden. Dabei wird mit Hilfe von transgenen Testerlinien die Beteiligung der einzelner Helikasen an verschiedenen Rekombinationswegen (intrachromosomale, interchromosomale, homeologe sowie meiotische Rekombination) geprüft. Schließlich soll versucht werden mittels biochemischer und genetischer Ansätze Interaktionsnetzwerke zwischen den Helikasen und anderen in DNA Rekombinationsprozesse involvierten Proteinen zu definieren, um die Rolle der einzelnen Helikasen umfassend zu charakterisieren.