Fluoreszenzlebensdauer-Manipulation in den autofluoreszierenden Proteinen: Entwicklungsstrategie für neue Anwendungen

该项目旨在设计自荧光蛋白质，通过诱变修饰获得更好的效果。Der erste Teil beinhaltet die de-novo Entwicklung einesizenzindikators für das Lifetime Imaging（FLIM）zum Ziel.由于绿色荧光蛋白（GFP）是一种氧化还原敏感性蛋白，它可以韦尔登，因此氧化还原电位是一种显著的生物体。还原一个二硫键在保护剂中形成一个二硫键功能，从而使发色团局部吸收，并使染料从染料中吸收。Die gemittelte diazenzlebensdauer ist so ein Masterpiece für das Verhältnis von reduziertem zu oxidiertem Protein.在第二个标记蛋白中，用于STED微芯片的微芯片可以韦尔登，在发展的最后阶段。在此，我们将设计一种具有最佳特性的蓝蛋白（BFP），它可以使蛋白质在紫外线照射下保持稳定性，并具有光稳定性和抗反射性，使其具有更好的发光性能。蛋白质工程的成果将成为一项独特的实验。因此，Rückkopplung将有效开发蛋白质。用金葡菌蛋白（GdFP）检测装置进行检测。

Dieses Projekt behandelt das Design autofluoreszierender Proteine, deren Fluoreszenzlebensdauer gezielt durch Mutagenese modifiziert wird. Der erste Teil beinhaltet die de-novo Entwicklung eines Fluoreszenzindikators für das Lifetime-Imaging (FLIM) zum Ziel. Es soll ein redoxsensitives Grün Fluoreszierendes Protein (GFP) etabliert werden, das das Redoxpotenzial eines markierten Organismus über die Fluoreszenzlebensdauer auszulesen gestattet. Die Reduktion einer Disulfid-Brücke im Proteingerüst zu einer Dithiolfunktion erhöht die lokale Flexibilität des Chromophors und begünstigt damit strahlungslose Kanäle aus dem angeregten Zustand. Die gemittelte Fluoreszenzlebensdauer ist so ein Maß für das Verhältnis von reduziertem zu oxidiertem Protein. Im zweiten Teil soll ein Markerprotein, welches für die räumlich hochauflösende STED-Mikroskopie verwendet werden kann, am Ende der Entwicklung stehen. Hier wird ein Blau Fluoreszierendes Protein (BFP) mit optimierten Eigenschaften entwickelt, wobei sich die Verbesserung auf eine Verlängerung der Fluoreszenzlebensdauer, eine gesteigerte Photostabilität und die An- und Abregbarkeit mit vergleichsweise billigen, gepulsten Diodenlasern beziehen. Der Erfolg im Laufe der Proteinentwicklung wird jeweils an einem eigens dafür gebauten Experiment überprüft. Durch diese Rückkopplung wird eine effiziente Entwicklung der Proteine gewährleistet. Getestet wird die Apparatur mit dem Gold Fluoreszierenden Protein (GdFP), das für beide Applikationen geeignet erscheint.