Système de transfection cellulaire neon

[中英文摘要]Mes Travaux en Recherche en Biologie Moléculaire et Cellaire nécessitent，Sur une base routinière，d‘Inducduire par转基因du matériel génétique(ADN plmidique，siRNA...)Dans des cell en cermaire dans le但d‘analyser et Caractériser Les régions des Promoteers qui sont nécessaire afin d’Assurer la转录de plsieur systèmes géniques.在培养过程中，我们使用了一种新的方法，即对L的细胞进行体外培养。LES加上勇气的用途是形成不溶于钙的磷酸盐，L‘ADNàInducduire Est Trappé，Asisi que L’Utilization de Lipoect de Lipoect tiques(Tel Que La Lipoeverines Et La Lipoect Tamine)。这是一种原始性的培养方法，很难存在于转基因技术领域。在这个过程中，我们看到了文化的进步和进步，因为L所在的国家和地区的经济和社会发展水平很高，而L和S的工作效率很高，L的工作也得到了很大的重视。在服装电泳法(“霓虹灯导入系统”)的帮助下，我们得到了一种新的治疗方法。在这场盛大的仪式上，我们来到了S的身边，这是一种有效的质粒和重组人的检测方法。S说，这是一种培养人的胚胎干细胞的方法，不可能的。L的大学是L大学的实验室，L的服装也是如此。S先生和L先生的关系紧凑，L先生和L先生的关系很密切，从最初的细胞培养到现在很难生存下去。L对服装的收购让S迫不及待地开始努力工作。

Mes travaux de recherche en biologie moléculaire et cellulaire nécessitent, sur une base routinière, d'introduire par transfection du matériel génétique (ADN plasmidique, siRNA...) dans des cellules en culture primaire dans le but d'analyser et caractériser les régions des promoteurs qui sont nécessaires afin d'assurer la transcription de plusieurs systèmes géniques. À ce jour, nous avons utilisé toute une panoplie d'approches expérimentales pour transfecter de l'ADN exogène dans des cellules en culture. Les plus couramment utilisées demeurent la formation d'un précipité insoluble de phosphate de calcium dans lequel l'ADN à introduire est trappé, ainsi que l'utilisation de lipides polycationiques (tel que la Lipofectine et la Lipofectamine). Toutefois, la plupart des cultures primaires de cellules humaines sont extrêmement difficiles à transfecter par ces approches. En effet, toutes les cultures primaires de cellules épithéliales provenant soit de peau, de cornées ou de rétines (cellules de Müller ou de l'EPR) humaines avec lesquelles nous travaillons présentement se sont révélées très difficile à transfecter efficacement, peu importe l'approche utilisée. Au cours des 20 dernières années, nous avons tenté sans succès de contourner cette difficulté en évaluant l'efficacité de nouvelles approches de transfection. Dans cette foulée, nous avons récemment évalué un appareil à électroporation (le 'NEON transfection system') vendu par la compagnie Invitrogen. À notre grand étonnement, nous sommes arrivés à introduire avec une très bonne efficacité tous les plasmides recombinants testés dans des cultures primaires de kératinocytes de peau humaine autrement impossibles à transfecter par d'autres approches. Toutefois, aucun laboratoire à l'Université Laval ne possède présentement cet appareil ou l'équivalent. Les travaux de recherche présentés dans cette demande requièrent donc de façon urgente l'achat d'un électroporateur compact qui nous permettra d'introduire de l'ADN par électroporation dans des primo-cultures de cellules humaines autrement extrêmement difficile à transfecter par les approches courantes. L'acquisition de cet appareil est donc très urgente puisque le travail de mes étudiants en dépend.