The molecular function of Ase1p: evidence for a MAP-dependent midzone-specific spindle matrix. Microtubule-associated proteins.
The molecular function of Ase1p: evidence for a MAP-dependent midzone-specific spindle matrix. Microtubule-associated proteins.
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DOI：
10.1083/jcb.200210021
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发表时间：
2003-02-17
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Pellman D
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Schuyler SC;Liu JY;Pellman D
中区是有丝分裂纺锤体的区域，在后期维持纺锤体的双极性，并产生纺锤体伸长（后期B）所需的力。尽管微管（MT）马达蛋白在纺锤体中区有明确的作用，但对于微管相关蛋白（MAPs）如何促进中区的组织和功能了解较少。在此，我们报道芽殖酵母Ase1p是中区特异性MAPs保守家族的成员。通过尺寸排阻色谱法和速度沉降法，提取物中的Ase1p和纯化的Ase1p都表现为同型二聚体。Ase1p在体外能结合并捆绑微管。通过活细胞显微镜观察，Ase1p的缺失导致一种特定的缺陷：在后期中期纺锤体过早解体。此外，当过度表达时，Ase1p足以在S期停滞的细胞中引发纺锤体伸长。荧光漂白恢复（FRAP）显示Ase1p在中区内的周转速率非常慢，并且沿纺锤体微管的侧向扩散有限。我们提出Ase1p作为一种微管交联桥发挥作用，赋予中区类似基质的特性。纺锤体中区MAPs的微管依赖性网络可能是假定的纺锤体基质的一个分子基础。
The midzone is the domain of the mitotic spindle that maintains spindle bipolarity during anaphase and generates forces required for spindle elongation (anaphase B). Although there is a clear role for microtubule (MT) motor proteins at the spindle midzone, less is known about how microtubule-associated proteins (MAPs) contribute to midzone organization and function. Here, we report that budding yeast Ase1p is a member of a conserved family of midzone-specific MAPs. By size exclusion chromatography and velocity sedimentation, both Ase1p in extracts and purified Ase1p behaved as a homodimer. Ase1p bound and bundled MTs in vitro. By live cell microscopy, loss of Ase1p resulted in a specific defect: premature spindle disassembly in mid-anaphase. Furthermore, when overexpressed, Ase1p was sufficient to trigger spindle elongation in S phase–arrested cells. FRAP revealed that Ase1p has both a very slow rate of turnover within the midzone and limited lateral diffusion along spindle MTs. We propose that Ase1p functions as an MT cross-bridge that imparts matrix-like characteristics to the midzone. MT-dependent networks of spindle midzone MAPs may be one molecular basis for the postulated spindle matrix.
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DOI：
10.1083/jcb.115.3.717
发表时间：
1991-11
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Butner KA;Kirschner MW
通讯作者：
Kirschner MW
DOI：
10.1083/jcb.118.1.109
发表时间：
1992-07
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Hoyt MA;He L;Loo KK;Saunders WS
通讯作者：
Saunders WS
DOI：
10.1073/pnas.231212498
发表时间：
2001-10-23
影响因子：
11.1
作者：
Gordon, DM;Roof, DM
通讯作者：
Roof, DM
影响因子：
64.8
作者：
Kashina, AS;Baskin, RJ;Scholey, JM
通讯作者：
Scholey, JM
影响因子：
19
作者：
Adams, RR;Carmena, M;Earnshaw, WC
通讯作者：
Earnshaw, WC