Purification of hemoglobin from red blood cells using tangential flow filtration and immobilized metal ion affinity chromatography.
Purification of hemoglobin from red blood cells using tangential flow filtration and immobilized metal ion affinity chromatography.
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DOI：
10.1016/j.jchromb.2010.11.021
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发表时间：
2011-01-15
影响因子：
3
通讯作者：
Palmer, Andre F.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Elmer, Jacob;Harris, David;Palmer, Andre F.
本文对两种从红细胞中提纯血红蛋白的方法进行了研究和比较。在第一种方法中，用50 nm切向流过滤器澄清红细胞裂解物，并使用固定化金属离子亲和色谱法（IMAC）纯化血红蛋白。在第二种方法中，用50 nm、500 kDa和50-100 kDa切向流过滤器处理RBC裂解物，然后用IMAC纯化血红蛋白。我们的研究结果表明，血红蛋白从两个过程中产生相同的血红蛋白产品是超纯的，并保留其生物物理特性（除了鸡血红蛋白，它显示不稳定的氧结合行为后纯化）。因此，Hb纯化的最有效方法似乎是用50 nm切向流过滤器澄清，然后用IMAC纯化，并在10-50 kDa切向流过滤器上进行样品浓缩/精制。
Two methods for purifying hemoglobin (Hb) from red blood cells (RBCs) are examined and compared. In the first method, red blood cell lysate is clarified with a 50 nm tangential flow filter and hemoglobin is purified using immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). In the second method, RBC lysate is processed with 50 nm, 500 kDa, and 50-100 kDa tangential flow filters, then hemoglobin is purified with IMAC. Our results show that the hemoglobins from both processes produce identical Hb products that are ultrapure and retain their biophysical properties (except for chicken hemoglobin, which shows erratic oxygen binding behavior after purification). Therefore, the most efficient method for Hb purification appears to be clarification with a 50 nm tangential flow filter, followed by purification with IMAC, and sample concentration/polishing on a 10-50 kDa tangential flow filter.
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影响因子：
2.9
作者：
Palmer, Andre F.;Sun, Guoyong;Harris, David R.
通讯作者：
Harris, David R.
DOI：
10.1016/j.jchromb.2008.02.014
发表时间：
2008-05-01
影响因子：
3
作者：
Sun, Guoyong;Palmer, Andre F.
通讯作者：
Palmer, Andre F.
影响因子：
4.4
作者：
Villarreal, D. M.;Phillips, C. L.;Henderson, D. P.
通讯作者：
Henderson, D. P.
影响因子：
3.4
作者：
CARRELL, RW;LEHMANN, H
通讯作者：
LEHMANN, H
影响因子：
64.8
作者：
PORATH, J;CARLSSON, J;BELFRAGE, G
通讯作者：
BELFRAGE, G