Microfluidic Generation of Lipidic Mesophases for Membrane Protein Crystallization.
Microfluidic Generation of Lipidic Mesophases for Membrane Protein Crystallization.
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DOI：
10.1021/cg900289d
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发表时间：
2009-06-03
影响因子：
3.8
通讯作者：
Kenis, Paul J. A.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Perry, Sarah L.;Roberts, Griffin W.;Tice, Joshua D.;Gennis, Robert B.;Kenis, Paul J. A.
我们报道了一种用于形成水/脂质中间相的微流体方法，以筛选在低于20纳升体积的膜状相中膜蛋白的合适结晶条件。这种集成的微流控芯片和所采用的混合策略解决了与高度不同粘度（这里为30倍）的流体混合以及由此产生的中间相的非牛顿特性相关的具体挑战。该芯片在每个筛选条件下需要不到20 μL的材料，而在目前的筛选方法中，批量制备通常需要10 μL或更多。我们用膜蛋白细菌视紫红质的成功结晶验证了我们的方法。
We report on a microfluidic method for the formation of aqueous/lipid mesophases to enable screening of suitable crystallization conditions of membrane proteins from a membrane-like phase in sub-20 nanoliter volumes. This integrated microfluidic chip and the employed mixing strategy address the specific challenges associated with the mixing of fluids of highly different viscosities (here a factor of 30) as well as the non-Newtonian character of the resulting mesophases. The chip requires less than 20 nL of material per condition screened whereas typically on the order of 10 μL or more is needed for a batch preparation in the present screening methods. We validated our approach with the successful crystallization of the membrane protein bacteriorhodopsin.
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