Use of antisense RNA to help identify a genomic clone for the 5' region of mouse beta-glucuronidase.

Use of antisense RNA to help identify a genomic clone for the 5' region of mouse beta-glucuronidase.
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使用反义 RNA 帮助鉴定小鼠 β-葡萄糖醛酸酶 5 区域的基因组克隆。

DOI:
10.1016/0006-291x(89)92525-4
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发表时间:
1989
影响因子:
3.1
通讯作者:
Erickson,RP
Erickson,RP
中科院分区:
生物学4区
文献类型:
--
作者:
Bevilacqua,A;Erickson,RP

文献摘要

参考文献

被引文献

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通过将含有完整基因的粘粒亚克隆的两条链制成的 RNA 注射到四细胞阶段的小鼠卵裂球中,可以测量对小鼠 β-葡萄糖醛酸酶表达的抑制。尽管我们的初始筛选没有识别出 5' 区域,但我们能够分离出一个亚克隆,该亚克隆与编码大鼠和人 β-葡萄糖醛酸酶结构基因 N 端氨基酸的 20 bp 同源。从 350 bpPstI 亚克隆的一条链制备的反义 RNA 可抑制 89% 的 β-葡萄糖醛酸酶表达,而从另一条链制备的 RNA 几乎没有影响。该亚克隆似乎与其他人鉴定的 350 bp 片段相对应,其中包括小鼠 β-葡萄糖醛酸酶的 ATG 起始位点。
It was possible to gauge the inhibition of mouse β-glucuronidase expression by injecting RNA, made from both strands of subclones of a cosmid containing the complete gene, into mouse blastomeres at the four-cell stage. Although our initial screen did not identify the 5′ region, we were able to isolate a subclone containing homology to 20 bp coding for N-terminal amino acids of rat and human β-glucuronidase structural genes. Antisense RNA prepared from one strand of the 350 bpPstI subclone inhibited β-glucuronidase expression by 89% while RNA prepared from the other strand had little effect. The subclone appears to correspond to the 350 bp fragment identified by others as one including the ATG start site of mouse β-glucuronidase.
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