Completely Chemically Synthesized Long DNA Can be Transcribed in Human Cells

Completely Chemically Synthesized Long DNA Can be Transcribed in Human Cells
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完全化学合成的长DNA可以在人体细胞中转录

DOI:
10.1002/cbic.202100312
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发表时间:
2021
期刊:
影响因子:
3.2
通讯作者:
Abe Hiroshi
Abe Hiroshi
中科院分区:
生物学3区
文献类型:
--
作者:
Yamaoka Kazuki;Oikawa Ryota;Abe Naoko;Nakamoto Kosuke;Tomoike Fumiaki;Hashiya Fumitaka;Kimura Yasuaki;Abe Hiroshi

文献摘要

参考文献

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DNA的化学连接反应可用于使用通过固相化学合成制备的寡核苷酸片段构建长功能DNA。然而,由连接反应形成的非天然连接结构通常会损害所得连接DNA的生物学功能。我们通过与硫代磷酸酯和卤代酰基修饰的DNA片段的多次化学连接反应实现了78和258 bp合成DNA的完全化学合成。 后者的合成DNA,编码荧光素酶基因的shRNA与设计的截短SV启动子序列,成功地诱导预期的基因沉默效果在HeLa细胞。
Chemical ligation reaction of DNA is useful for the construction of long functional DNA using oligonucleotide fragments that are prepared by solid phase chemical synthesis. However, the unnatural linkage structure formed by the ligation reaction generally impairs the biological function of the resulting ligated DNA. We achieved the complete chemical synthesis of 78 and 258 bp synthetic DNAs via multiple chemical ligation reactions with phosphorothioate and haloacyl‐modified DNA fragments. The latter synthetic DNA, coding shRNA for luciferase genes with a designed truncated SV promoter sequence, successfully induced the expected gene silencing effect in HeLa cells.
DOI: 10.1002/ange.19941060230
发表时间: 1994
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影响因子: --
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