An extended γ-tubulin ring functions as a stable platform in microtubule nucleation.
An extended γ-tubulin ring functions as a stable platform in microtubule nucleation.
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DOI：
10.1083/jcb.201111123
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发表时间：
2012-04-02
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Schiebel E
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Erlemann S;Neuner A;Gombos L;Gibeaux R;Antony C;Schiebel E
酵母中的微管成核位点由γ-微管蛋白小复合物环和稍微过量的未复合的γ-微管蛋白组成。 γ-微管蛋白复合物对于微管 (MT) 成核至关重要。 γ-微管蛋白小复合物（γ-TuSC）由两分子γ-微管蛋白和各一分子Spc97和Spc98组成。在体外，γ-TuSCs 寡聚成每圈 13 个 γ-微管蛋白分子的螺旋。然而，体内MT成核位点的γ-TuSCs的性质和数量尚不清楚。在本文中，我们通过光漂白分析后的荧光恢复表明，γ-微管蛋白稳定地整合到 MT 成核位点，并通过微管蛋白结合进一步稳定。重要的是，微管蛋白与成核位点的相互作用比与 MT 加端的相互作用更强，这可能为 MT 成核提供了基础。对单个 MT 负端上 γ-TuSC 的定量分析表明，成核位点由大约七个 γ-TuSC 和大约三个额外的 γ-微管蛋白分子组成。 MT 的成核和锚定需要相同数量的 γ-微管蛋白分子。我们认为，七个 γ-TuSC 的螺旋结构以及略微过剩的 γ-微管蛋白在体内使 MT 成核。
Microtubule nucleation sites in yeast consist of a ring of γ-tubulin small complexes and a slight excess of uncomplexed γ-tubulin. γ-Tubulin complexes are essential for microtubule (MT) nucleation. The γ-tubulin small complex (γ-TuSC) consists of two molecules of γ-tubulin and one molecule each of Spc97 and Spc98. In vitro, γ-TuSCs oligomerize into spirals of 13 γ-tubulin molecules per turn. However, the properties and numbers of γ-TuSCs at MT nucleation sites in vivo are unclear. In this paper, we show by fluorescence recovery after photobleaching analysis that γ-tubulin was stably integrated into MT nucleation sites and was further stabilized by tubulin binding. Importantly, tubulin showed a stronger interaction with the nucleation site than with the MT plus end, which probably provides the basis for MT nucleation. Quantitative analysis of γ-TuSCs on single MT minus ends argued for nucleation sites consisting of approximately seven γ-TuSCs with approximately three additional γ-tubulin molecules. Nucleation and anchoring of MTs required the same number of γ-tubulin molecules. We suggest that a spiral of seven γ-TuSCs with a slight surplus of γ-tubulin nucleates MTs in vivo.
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DOI：
10.1083/jcb.200912022
发表时间：
2010-06-14
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Johnston K;Joglekar A;Hori T;Suzuki A;Fukagawa T;Salmon ED
通讯作者：
Salmon ED
DOI：
10.1126/science.1205193
发表时间：
2011-06-24
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Keck JM;Jones MH;Wong CC;Binkley J;Chen D;Jaspersen SL;Holinger EP;Xu T;Niepel M;Rout MP;Vogel J;Sidow A;Yates JR 3rd;Winey M
通讯作者：
Winey M
影响因子：
14.9
作者：
Chenna, R;Sugawara, H;Thompson, JD
通讯作者：
Thompson, JD
影响因子：
11.8
作者：
Kitamura E;Tanaka K;Komoto S;Kitamura Y;Antony C;Tanaka TU
通讯作者：
Tanaka TU
影响因子：
7.8
作者：
Chen, XYP;Yin, HW;Huffaker, TC
通讯作者：
Huffaker, TC