Highly Efficient Site-Specific Mutagenesis in Malaria Mosquitoes Using CRISPR.
Highly Efficient Site-Specific Mutagenesis in Malaria Mosquitoes Using CRISPR.
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DOI：
10.1534/g3.117.1134
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发表时间：
2018-02-02
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
White BJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Li M;Akbari OS;White BJ
按蚊每年在全世界传播至少2亿例疟疾感染。尽管有相当多的基因组资源，但由于缺乏反向遗传学工具，对按蚊生物过程的机械理解受到阻碍。在这里，我们报告了CRISPR/Cas9系统在不同疟疾载体白纹按蚊（Anopheles albimanus）、A. coluzzii和A. funestus。当以高浓度注射向导RNA（gRNA）和Cas9蛋白时，种系突变是常见的并且通常是双等位基因的，从而允许快速创建稳定的突变株系用于反向遗传分析。我们的方案应该使研究人员能够剖析按蚊性状的分子和细胞基础，这些性状对成功的疾病传播至关重要，有可能揭示疟疾控制的新目标。
Anopheles mosquitoes transmit at least 200 million annual malaria infections worldwide. Despite considerable genomic resources, mechanistic understanding of biological processes in Anopheles has been hampered by a lack of tools for reverse genetics. Here, we report successful application of the CRISPR/Cas9 system for highly efficient, site-specific mutagenesis in the diverse malaria vectors Anopheles albimanus, A. coluzzii, and A. funestus. When guide RNAs (gRNAs) and Cas9 protein are injected at high concentration, germline mutations are common and usually biallelic, allowing for the rapid creation of stable mutant lines for reverse genetic analysis. Our protocol should enable researchers to dissect the molecular and cellular basis of anopheline traits critical to successful disease transmission, potentially exposing new targets for malaria control.
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影响因子：
64.5
作者：
Hsu PD;Lander ES;Zhang F
通讯作者：
Zhang F
影响因子：
3.1
作者：
Benedict, MQ;Besansky, NJ;Collins, FH
通讯作者：
Collins, FH
CRISPR-CAS9介导的基因失活的高度活性SGRNA的合理设计。
影响因子：
46.9
作者：
Doench, John G.;Hartenian, Ella;Graham, Daniel B.;Tothova, Zuzana;Hegde, Mudra;Smith, Ian;Sullender, Meagan;Ebert, Benjamin L.;Xavier, Ramnik J.;Root, David E.
通讯作者：
Root, David E.
影响因子：
3.7
作者：
Dong S;Lin J;Held NL;Clem RJ;Passarelli AL;Franz AW
通讯作者：
Franz AW
DOI：
10.1126/science.aaa2850
发表时间：
2015-06-12
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Hall AB;Basu S;Jiang X;Qi Y;Timoshevskiy VA;Biedler JK;Sharakhova MV;Elahi R;Anderson MA;Chen XG;Sharakhov IV;Adelman ZN;Tu Z
通讯作者：
Tu Z