Electroporation enables the efficient mRNA delivery into the mouse zygotes and facilitates CRISPR/Cas9-based genome editing.
Electroporation enables the efficient mRNA delivery into the mouse zygotes and facilitates CRISPR/Cas9-based genome editing.
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DOI：
10.1038/srep11315
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发表时间：
2015-06-11
影响因子：
4.6
通讯作者：
Takemoto T
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Hashimoto M;Takemoto T
最近使用CRISPR/Cas9系统大大减少了产生突变小鼠所需的时间，但耗时的显微注射步骤仍然阻碍了其在高通量遗传分析中的应用。在这里，我们开发了一种简单，高效，大规模的基因组编辑方法，其中CRISPR/Cas9系统的RNA被电穿孔到受精卵中，而不是显微注射。我们用这种方法进行单链寡脱氧核苷酸（ssODN）介导的敲入小鼠胚胎。这种方法有助于在小鼠中进行大规模的遗传分析。
Recent use of the CRISPR/Cas9 system has dramatically reduced the time required to produce mutant mice, but the involvement of a time-consuming microinjection step still hampers its application for high-throughput genetic analysis. Here we developed a simple, highly efficient, and large-scale genome editing method, in which the RNAs for the CRISPR/Cas9 system are electroporated into zygotes rather than microinjected. We used this method to perform single-stranded oligodeoxynucleotide (ssODN)-mediated knock-in in mouse embryos. This method facilitates large-scale genetic analysis in the mouse.
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