The baculovirus single-stranded DNA binding protein, LEF-3, forms a homotrimer in solution
The baculovirus single-stranded DNA binding protein, LEF-3, forms a homotrimer in solution
复制标题
杆状病毒单链 DNA 结合蛋白 LEF-3 在溶液中形成同源三聚体
作者：
J. Evans;G. Rohrmann
LEF-3是苜蓿银纹夜蛾多核衣壳多角体病毒瞬时DNA复制所需的六种蛋白质之一，具有单链DNA结合蛋白的性质。在这份报告中，我们表明，LEF-3相互作用与自身在酵母双杂交试验和谷胱甘肽S-转移酶融合亲和力测定。不能与全长LEF-3相互作用的LEF-3缺失克隆也不能支持瞬时DNA复制，这表明这种相互作用是LEF-3的正常功能所必需的。将LEF-3纯化至均一，并通过分析性超离心和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行表征。这些研究表明，LEF-3是作为一个132-kDa的复合物，表明其天然构象是同源三聚体。通过与戊二醛交联，然后通过基质辅助激光解吸/电离质谱法证实了这一结果。
LEF-3 is one of six proteins from Autographa californica multinucleocapsid polyhedrosis virus required for transient DNA replication and has the properties of a single-stranded DNA binding protein. In this report we demonstrate that LEF-3 interacts with itself in both yeast two-hybrid assays and glutathione S-transferase fusion affinity assays. LEF-3 deletion clones which were unable to interact with full-length LEF-3 also failed to support transient DNA replication, suggesting that this interaction is required for the proper function of LEF-3. LEF-3 was purified to homogeneity and characterized by analytical ultracentrifugation and native polyacrylamide gel electrophoresis. These studies revealed that LEF-3 was present as a 132-kDa complex, indicating that its native conformation is that of a homotrimer. This result was confirmed by cross-linking with glutaraldehyde followed by matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry.
登录
查看更多内容
DOI：
10.1073/pnas.91.23.11212
发表时间：
1994-11-08
影响因子：
11.1
作者：
KOOL, M;AHRENS, CH;VLAK, JM
通讯作者：
VLAK, JM
影响因子：
56.9
作者：
CLEM, RJ;FECHHEIMER, M;MILLER, LK
通讯作者：
MILLER, LK
使用单克隆抗体表征杆状病毒 p10 合成。
影响因子：
3.7
作者：
Quant-Russell,RL;Pearson,MN;Rohrmann,GF;Beaudreau,GS
通讯作者：
Beaudreau,GS
影响因子：
10.5
作者：
DURFEE, T;BECHERER, K;ELLEDGE, SJ
通讯作者：
ELLEDGE, SJ
钙调蛋白中二酪氨酸的形成：节霉菌过氧化物酶催化的交联和聚合。
影响因子：
2.9
作者：
Malencik,DA;Anderson,SR
通讯作者：
Anderson,SR