Application of fluorescence polarization microscopy to measure fluorophore orientation in the outer hair cell plasma membrane.
Application of fluorescence polarization microscopy to measure fluorophore orientation in the outer hair cell plasma membrane.
复制标题
应用荧光偏振显微镜测量外毛细胞质膜中的荧光团方向。
DOI：
10.1117/1.2717499
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发表时间：
2007
影响因子：
3.5
通讯作者：
Raphael,RobertM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Greeson,JenniferN;Raphael,RobertM
细胞膜的生物物理性质和组织调节许多基于膜的过程，包括耳蜗外毛细胞（OHC）中的电运动。膜环境的研究可以通过使用荧光偏振显微镜（FPM）测量膜结合荧光团的取向来进行。由于OHC的圆柱形状，现有的FPM理论开发的球形细胞是不适用的。我们发展了一种新的方法来分析FPM数据适用于准圆柱OHC。我们提出了这个模型的理论，以及荧光探针吡啶，4-[2-[6-（二辛基氨基）-2-萘基]乙烯基]-1-（3-磺丙基）（二-8-ANEPPS）在OHC膜的方向的研究。我们的结果表明，二-8-ANEPPS的吸收跃迁偶极矩的取向对称的膜垂直于相对于膜的平面。观察到的理论预测和实验测量之间的协议建立FPM研究OHC质膜性能的适用性。
The biophysical properties and organization of cell membranes regulate many membrane-based processes, including electromotility in outer hair cells (OHCs) of the cochlea. Studies of the membrane environment can be carried out by measuring the orientation of membrane-bound fluorophores using fluorescence polarization microscopy (FPM). Due to the cylindrical shape of OHCs, existing FPM theory developed for spherical cells is not applicable. We develop a new method for analyzing FPM data suitable for the quasi-cylindrical OHC. We present the theory for this model, as well as a study of the orientation of the fluorescent probe pyridinium, 4-[2-[6-(dioctylamino)-2-naphthalenyl]ethenyl]-1-(3-sulfopropyl) (di-8-ANEPPS) in the OHC membrane. Our results indicate that the absorption transition dipole moment of di-8-ANEPPS orients symmetrically about the membrane normal atwith respect to the plane of the membrane. The observed agreement between theoretical predictions and experimental measurements establishes the applicability of FPM to study OHC plasma membrane properties.
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