In vivo imaging of C. elegans endocytosis.
In vivo imaging of C. elegans endocytosis.
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DOI：
10.1016/j.ymeth.2014.03.028
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发表时间：
2014-08-01
期刊：
影响因子：
4.8
通讯作者：
Audhya, Anjon
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Wang, Lei;Audhya, Anjon
在过去的十年中，早期秀丽隐杆线虫胚胎已被证明是研究各种膜运输事件的有用动物模型，至少部分原因是它的大尺寸，光学透明度和易于操作。重要的是，在胚胎早期发生的膜重塑的定型性质使内吞通量的定量测量成为可能。在缺乏外源刺激的情况下，受精触发的细胞周期恢复与质膜内容物的戏剧性重新分配相结合。许多蛋白质通过网格蛋白介导的内吞作用迅速内化，这些货物的命运可以在子宫内使用实时成像精确跟踪。这些研究的关键是维持动物的健康和固定，这在延长的成像过程中可能成为技术上的挑战。在这里，我们重点介绍了活体成像技术的最新进展，这些技术促进了对活体动物内吞运输的研究。我们专注于使用转基因秀丽隐杆线虫菌株，稳定地表达荧光标记的蛋白质，包括内体系统的成分和穿越膜网络的货物分子。我们的研究结果证明秀丽隐杆线虫胚胎在定义控制内吞运输的许多步骤的调节机制方面的效用。
Over the past decade, the early C. elegans embryo has proven to be a useful animal model to study a variety of membrane trafficking events, at least in part due to its large size, optical transparency, and ease of manipulation. Importantly, the stereotypic nature of membrane remodeling that occurs during early embryogenesis has enabled quantitative measurement of endocytic flux. In the absence of exogenous stimulation, resumption of the cell cycle triggered by fertilization is coupled to a dramatic redistribution of plasma membrane content. Numerous proteins are rapidly internalized via clathrin-mediated endocytosis, and the fate of these cargoes can be followed precisely using live imaging in utero. Key to these studies is the maintenance of animal health and their immobilization, which can become technically challenging during extended imaging sessions. Here we highlight recent advances in live imaging techniques that have facilitated the interrogation of endocytic transport in live animals. We focus on the use of transgenic C. elegans strains that stably express fluorescently-tagged proteins, including components of the endosomal system and cargo molecules that traverse this network of membranes. Our findings demonstrate the utility of the C. elegans embryo in defining regulatory mechanisms that control the numerous steps of endocytic trafficking.
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影响因子：
3.7
作者：
Kim E;Sun L;Gabel CV;Fang-Yen C
通讯作者：
Fang-Yen C
DOI：
10.1083/jcb.201206008
发表时间：
2012-08-20
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Olson SK;Greenan G;Desai A;Müller-Reichert T;Oegema K
通讯作者：
Oegema K
DOI：
10.1083/jcb.201306036
发表时间：
2013-11-11
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Green RA;Mayers JR;Wang S;Lewellyn L;Desai A;Audhya A;Oegema K
通讯作者：
Oegema K
影响因子：
6.1
作者：
Hulme, S. Elizabeth;Shevkoplyas, Sergey S.;Whitesides, George M.
通讯作者：
Whitesides, George M.
影响因子：
9.2
作者：
Merritt, Christopher;Rasoloson, Dominique;Ko, Darae;Seydoux, Geraldine
通讯作者：
Seydoux, Geraldine