Identification of the 5' sequences required for incorporation of an engineered ssRNA into the Reovirus genome.
Identification of the 5' sequences required for incorporation of an engineered ssRNA into the Reovirus genome.
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鉴定将工程化 ssRNA 掺入呼肠孤病毒基因组所需的 5 序列。
DOI：
10.1016/j.virol.2004.08.026
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发表时间：
2004
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
J. Roehr
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
M. Roner;Kelly D. Bassett;J. Roehr
使用呼肠孤病毒反向遗传学系统，我们已经鉴定了工程化s2 ssRNA有效掺入呼肠孤病毒dsRNA基因组所需的5′序列。利用保留野生型S2片段的前198个5′端核苷酸和最后284个3′端核苷酸的工程化的、功能活性的呼肠孤病毒S2/CAT基因，我们确定了ssRNA被识别、复制成dsRNA并稳定地掺入感染性呼肠孤病毒所需的5′端序列。5′端序列保留了野生型s2 ssRNA的96个核苷酸和预测的序列结构元件。在这96个核苷酸中，我们已经鉴定了位置79-81处的三个核苷酸A-U-U，其对于将体外产生的ssRNA掺入新的呼肠孤病毒子代病毒颗粒中是必需的。该研究为进一步研究呼肠孤病毒dsRNA基因组中所有10种ssRNA的分类和整合机制奠定了坚实的基础。
Using a reovirus reverse genetics system, we have identified the 5′ sequences required of an engineered s2 ssRNA for efficient incorporation into the dsRNA genome of Reovirus. Employing an engineered, functionally active reovirus S2/CAT gene retaining the first 198 5′ terminal nucleotides and the last 284 3′ terminal nucleotides of the wild-type S2 segment, we have determined the 5′ sequence required by a ssRNA to be recognized, replicated to dsRNA, and stably incorporated into an infectious reovirus. The 5′ sequence retains 96 nucleotides of the wild-type s2 ssRNA and a predicted sequence–structure element. Within these 96 nucleotides, we have identified three nucleotides A-U-U at positions 79–81 that are essential for the incorporation of in vitro-generated ssRNAs into new reovirus progeny viral particles. This study establishes a firm foundation for additional investigation into the assortment and encapsidation mechanism of all 10 ssRNAs into the dsRNA genome of reovirus.
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影响因子：
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作者：
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通讯作者：
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