Methodology for reliable and reproducible cryopreservation of human cervical tissue.
Methodology for reliable and reproducible cryopreservation of human cervical tissue.
复制标题
DOI：
10.1016/j.cryobiol.2017.06.004
复制
发表时间：
2017-08
期刊：
影响因子：
2.7
通讯作者：
Martin F
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Fox JM;Wiggins RC;Moore JWJ;Brewer C;Hunter B;Andrew AC;Martin F
为了在合适的时间对捐赠的宫颈组织进行实验室研究，需要有效和可靠的宫颈组织冷冻保存方案。设计了一种主动冷冻方法，利用胎牛血清中的10%二甲基亚砜作为冷冻保护剂，冷却速率为1 °C/min至−50 °C，然后以10 °C/min至−120 °C;还优化了相关的解冻方案，这将允许宫颈组织的生物银行。利用MTT比色法比较新鲜收获的宫颈组织与冻融样品的活力。同时，在第1、7和14天培养和检测新鲜和冻融样品，以确定生物建库是否随时间推移对组织活力产生有害影响。重复测试显示，新鲜样品和冻融样品之间的组织活力在所有四个时间点（第0、1、7和14天）都相当，活力没有明显降低，因此证明这种冷冻保存宫颈组织的方法是可靠的和可重现的，对活组织培养没有不利影响。我们相信这种方法为捐赠的宫颈组织的生物银行创造了机会，这有助于改进实验设计，减少时间压力和浪费。
In order to conduct laboratory studies on donated cervical tissue at suitable times an effective and reliable cryopreservation protocol for cervical tissue is required. An active freezing approach was devised utilising 10% dimethyl sulfoxide in foetal bovine serum as a cryoprotective agent with a cooling rate of 1 °C/min to −50 °C then 10 °C/min to −120 °C; a related thawing protocol was also optimised which would allow for the bio-banking of cervical tissue. Viability of freshly harvested cervical tissue was compared to frozen-thawed samples utilising colorimetric MTT assay. In parallel, fresh and freeze-thawed samples were cultured and tested on days 1, 7 and 14 to determine whether bio-banking had detrimental effects on tissue viability over time. Repeat testing revealed that tissue viability between fresh and freeze-thawed samples was comparable at all four time points (days 0, 1, 7 and 14) with no apparent reductions of viability, thus demonstrating this method of cryopreserving cervical tissue is reliable and reproducible, without detrimental effects on live tissue culture. We believe this methodology creates the opportunity for bio-banking donated cervical tissues, which aids improved experimental design and reduces time pressures and wastage.
登录
查看更多内容
影响因子：
3.7
作者：
Rohan LC;Moncla BJ;Kunjara Na Ayudhya RP;Cost M;Huang Y;Gai F;Billitto N;Lynam JD;Pryke K;Graebing P;Hopkins N;Rooney JF;Friend D;Dezzutti CS
通讯作者：
Dezzutti CS
影响因子：
3.7
作者：
Shen C;Ding M;Ratner D;Montelaro RC;Chen Y;Gupta P
通讯作者：
Gupta P
影响因子：
2.6
作者：
Best BP
通讯作者：
Best BP
人羊水干细胞冷冻保存的不同冷冻方法和冷冻保护剂的评估。
影响因子：
--
作者：
Janz Fde L;Debes Ade A;Cavaglieri Rde C;Duarte SA;Romão CM;Morón AF;Zugaib M;Bydlowski SP
通讯作者：
Bydlowski SP
影响因子：
3.8
作者：
Sassi, AB;McCullough, D;Rohan, LC
通讯作者：
Rohan, LC