Control of epigenetic transgene silencing

表观遗传转基因沉默的控制

• 批准号: 133348763
• 负责人: Professor Dr. Heinrich Leonhardt
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Humanbiologie und Bioimaging
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2008-12-31 至 2017-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/133348763?language=en
• 关键词: Control; epigenetic; transgene; silencing

Transkriptionelle Stilllegung durch epigenetische Mechanismen ist ein ernstes Problem, das die stabile Expression von Transgenen in Zellen, Tieren und der Gentherapie behindert. Die epigenetische Stilllegung von integrierten und episomalen Vektoren korreliert mit DNA und Histonmodifikationen aber die beteiligten Mechanismen sind noch weitgehend unbekannt. Wir haben jetzt einen Assay entwickelt zur Identifizierung von cis und trans aktiven Faktoren, die an der epigenetische Stilllegung von Transgenen beteiligt sind. Der Assay verfolgt die differentielle Expression von zwei fluoreszenten Reportern mittels automatisierter Bildaufnahme und Auswertung. Wir werden diesen Assay weiterentwickeln und damit die epigenetische Stabilität verschiedener Promotorsequenzen vergleichen und Sequenzelemente identifizieren, die die epigenetische Stilllegung begünstigen oder verhindern. Ferner werden wir mit diesem Assay die Beteiligung von Wirtsfaktoren untersuchen. Wir haben bereits die Rolle der verschiedenen DNA Methyltransferasen untersucht und werden nun interagierende Proteine und Histon-modifizierende Enzyme einschließen. Dieses Projekt sollte zur Aufklärung grundlegender Mechanismen der epigenetischen Stilllegung von Transgenen beitragen und damit die gezielte Entwicklung von Genvektoren und Strategien für eine stabile Langzeitexpression von Transgenen ermöglichen.

Transkriptionelle Stilllegung durch epigenetische Mechanismen ist ein ernstes Problem, das die stable Expression von Transgenen in Zellen, Tieren und der Gentherapie Behindert.与 DNA 和组织修饰相关的表观遗传整合和附加载体的机制是未知的。我们可以通过顺式和反式活性鉴定来进行检测，并通过转基因进行表观遗传学分析。检测结果与荧光报告中的差异表达具有自动检测和分析功能。我们分析了表观遗传的稳定性，并确定了启动子序列和序列元素的识别，使表观遗传开始或结束。 Ferner werden wir mit diesem Assay die Beteiligung von Wirtsfaktoren untersuchen。我们已经了解了 DNA 甲基转移酶的作用以及蛋白质和组蛋白修饰酶之间的相互作用。该项目解决了转基因的表观遗传机制和转基因技术的发展以及转基因的稳定表达策略的问题。