Prozesstechnische Untersuchungen zum Einsatz von Enzymen bei der Aufarbeitung biotechnologischer Produkte (Downstream Processing). Entwicklung eines Verfahrens zur Beseitigung von Endotoxinen unter Verwendung von Biokatalysatoren

脂多糖（LPS，内毒素）与大肠杆菌膜革兰氏阴性菌（大肠杆菌，鼠伤寒沙门氏菌，霍乱弧菌）和lösen im Menschen im /kg(Körpergewicht)-Maßstab Immunreaktionen von Fieber bis hin zum septischen Schock aus。Diese molek<e:1> le bedecken约75% der Oberfläche和werden z. B. bei der Zellteilung in das Kulturmedium abgegeben。behder Reinigung intrazellulärer Produkte sorgt der Scherstress, der aufgewendet werden muss, um die Zellwände aufzubrechen, ebenfalls daf<e:1> r, ass LPS in das Lösungsmittel (Aufschlusspuffer) freigesetzt werden。临床治疗与临床研究协会（beder Herstellung von Therapeutika and werkstoffen msssen）： LPS应在Verlaufe des aufarbeitungsproesses unbedingt beititungsproesses werden中使用。Das <s:1> bliche Verfahren beruht letztendlich auf der¿verd<e:1> nnung der Ausgangslösung mit内毒素无水（注射用水，WFI） während der下游- prozesse。LPS蛋白吸入性蛋白Lösungen的研究进展[j]。(1)生物化学与医学（biochemische and mediische Untersuchungen zur Beziehung zwischen strukgen zwischen）和纤维（fiber - erregengenvon endotolxinen gibt），内毒素（endotolxinen gibt），内毒素（endotolxinen gibt），内毒素（endotolinexinen gibt），内毒素（endotolinexinen），内毒素（endotolinexinen），内毒素（endotolinexinen），内毒素（endotolinexinen），内毒素（endotolinexinen），内毒素（endotolinexinen），内毒素（endotolinexinen） Ansätze。[2][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1]。Bevorzugt sollen solche酶verwendet werden， die eine hohe Spezifität bez<s:1> glich der Verunreinigungen besitzen和das zielproduct unverändert lassen。Entsprechende生物催化系统的分子识别（bestiming der N-terminalen Sequenz），特征识别和固定化识别。

Lipopolysaccharide (LPS, Endotoxine) sind Bestandteile der äußeren Membran gram-negativer Bakterien (z. B. Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Vibrio cholerae) und lösen im Menschen im ng/kg(Körpergewicht)-Maßstab Immunreaktionen von Fieber bis hin zum septischen Schock aus. Diese Moleküle bedecken ca. 75 % der Oberfläche und werden z. B. bei der Zellteilung in das Kulturmedium abgegeben. Bei der Reinigung intrazellulärer Produkte sorgt der Scherstress, der aufgewendet werden muss, um die Zellwände aufzubrechen, ebenfalls dafür, dass LPS in das Lösungsmittel (Aufschlusspuffer) freigesetzt werden. Bei der Herstellung von Therapeutika und Wirkstoffen müssen LPS deshalb im Verlaufe des Aufarbeitungsprozesses unbedingt beseitigt werden. Das übliche Verfahren beruht letztendlich auf der ¿Verdünnung der Ausgangslösung mit endotoxin-freiem Wasser (Water for injection, WFI) während der Downstream-Prozesse. Andere Verfahren sind bezüglich der Abtrennung von LPS aus proteinhaltigen Lösungen ineffektiv und haben keine technische Bedeutung erlangt. Obwohl es biochemische und medizinische Untersuchungen zur Beziehung zwischen Struktur und fiebererregender Wirkung von Endotoxinen gibt, in deren Zusammenhang auch Enzyme zur Herstellung von Teilstrukturen von LPS eingesetzt wurden, gibt es bisher erstaunlicherweise keine Ansätze, Biokatalysatoren in technischen Verfahren zur Abreicherung dieser Verunreinigungen einzusetzen. Ziel des Vorhabens ist es daher, geeignete Biokatalysatoren aufzufinden und für die vollständige Beseitigung von Endotoxinen nutzbar zu machen. Bevorzugt sollen solche Enzyme verwendet werden, die eine hohe Spezifität bezüglich der Verunreinigungen besitzen und das Zielprodukt unverändert lassen. Entsprechende Biokatalysatoren sollen identifiziert (Bestimmung der N-terminalen Sequenz), charakterisiert und immobilisiert werden.