Prozesstechnische Untersuchungen zum Einsatz von Enzymen bei der Aufarbeitung biotechnologischer Produkte (Downstream Processing). Entwicklung eines Verfahrens zur Beseitigung von Endotoxinen unter Verwendung von Biokatalysatoren

在生物技术产品加工（下游加工）中使用酶的工艺工程研究。

• 批准号: 13759183
• 负责人: Professor Dr. Markus Pietzsch
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Aufarbeitung biotechnischer Produkte
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/13759183?language=en
• 关键词: Prozesstechnische; Untersuchungen; zum; Einsatz; von

Lipopolysaccharide (LPS, Endotoxine) sind Bestandteile der äußeren Membran gram-negativer Bakterien (z. B. Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Vibrio cholerae) und lösen im Menschen im ng/kg(Körpergewicht)-Maßstab Immunreaktionen von Fieber bis hin zum septischen Schock aus. Diese Moleküle bedecken ca. 75 % der Oberfläche und werden z. B. bei der Zellteilung in das Kulturmedium abgegeben. Bei der Reinigung intrazellulärer Produkte sorgt der Scherstress, der aufgewendet werden muss, um die Zellwände aufzubrechen, ebenfalls dafür, dass LPS in das Lösungsmittel (Aufschlusspuffer) freigesetzt werden. Bei der Herstellung von Therapeutika und Wirkstoffen müssen LPS deshalb im Verlaufe des Aufarbeitungsprozesses unbedingt beseitigt werden. Das übliche Verfahren beruht letztendlich auf der ¿Verdünnung der Ausgangslösung mit endotoxin-freiem Wasser (Water for injection, WFI) während der Downstream-Prozesse. Andere Verfahren sind bezüglich der Abtrennung von LPS aus proteinhaltigen Lösungen ineffektiv und haben keine technische Bedeutung erlangt. Obwohl es biochemische und medizinische Untersuchungen zur Beziehung zwischen Struktur und fiebererregender Wirkung von Endotoxinen gibt, in deren Zusammenhang auch Enzyme zur Herstellung von Teilstrukturen von LPS eingesetzt wurden, gibt es bisher erstaunlicherweise keine Ansätze, Biokatalysatoren in technischen Verfahren zur Abreicherung dieser Verunreinigungen einzusetzen. Ziel des Vorhabens ist es daher, geeignete Biokatalysatoren aufzufinden und für die vollständige Beseitigung von Endotoxinen nutzbar zu machen. Bevorzugt sollen solche Enzyme verwendet werden, die eine hohe Spezifität bezüglich der Verunreinigungen besitzen und das Zielprodukt unverändert lassen. Entsprechende Biokatalysatoren sollen identifiziert (Bestimmung der N-terminalen Sequenz), charakterisiert und immobilisiert werden.

脂多糖（LPS，Endotoxine）是革兰氏阴性菌Bakterien（z. B。大肠埃希菌、鼠伤寒沙门氏菌、霍乱弧菌），并在人中检出ng/kg（Körpergewicht）-Maßstab Immunreaktionen von Fieber bis hin zum septischen Schock aus。Diese Moleküle bedecken ca. 75%的上翼和韦尔登翼。B。在文化媒介中的Zellteilung。在加强内部生产的同时，必须加强韦尔登，使润滑油在润滑油（润滑油）中的流动性降低到韦尔登中。在对治疗和Wirkstoffen的研究中，LPS在辅助治疗过程中发挥了重要作用，但韦尔登并不明显。Das übliche Verfahren beruht letztendlich auf der <$Verdünnung der Ausgangslösung mit endotoxin-freiem瓦塞尔（注射用水，WFI）während der Downstream-Prozesse。另外，由于蛋白吸入剂的无效性和技术上的不合理性，LPS的抑制是非常困难的。尽管生物化学和医学对内毒素的结构和功能的影响，但在LPS的结构和功能的降解酶方面，生物化学和医学对内毒素的影响并不明显，生物催化剂在技术上可以减少内毒素的释放。Ziel des Vorhabens is daher，geeignete Biokatalysatoren aufzufinden und für die vollständige Beseitigung von Endotoxinen nutzbar zu machen.因此，必须使用韦尔登，这样才能确保产品的质量和产品的质量。Entsprechende Biokatalysatoren sollen identifiziert（Bestimmung der N-terminalen Sequenz），charakterisiert und immobilisiert韦尔登.