Funktionalitätsanalyse von Toxinen aus Clostridium perfringens

产气荚膜梭菌毒素的功能分析

• 批准号: 15437734
• 负责人: Dr. Oliver Knapp
• 金额: --
• 依托单位: Développement des Tissues Lymphoides
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/15437734?language=en
• 关键词: Funktionalit; tsanalyse; von; Toxinen; aus

Vielen pathogenen Bakterien wird erfolgreiche Kolonialisierung ihres Wirtes erst durch die Produktion von Proteintoxinen ermöglicht. Eine ganze Reihe dieser Toxine schädigen eukaryontische Zellen durch eine Modifikation eines intrazellulären Ziels. Dabei spielen Transportproteine eine wichtige Rolle, die entweder Teil des Toxinmoleküls sind oder separat ins Kulturmedium abgegeben werden. Ziel dieses Projektes ist die Untersuchung dieser Transportfunktion durch die Aufklärung der Struktur der Transportproteine. Im einzelnen sollen folgende Toxine untersucht werden: 1. Clostridium perfringens Iota-Toxin besteht aus zwei voneinander unabhängigen Proteinen. Iota-a (Ia) trägt die enzymatische Funktion, während Iota-b (Ib) für die Wirtszellbindung und den Transport der Enzymkomponente Ia in die Zielzelle verantwortlich ist. Der für diesen Transportprozess verantwortliche Mechanismus der Bindekomponente soll mit Hilfe von Punkt- Bzw. Kassettenmutanten in Zellkultur- und Black-Lipid-Bilayerexperimenten aufgeklärt werden. Des Weiteren soll die Iota-Toxin-Produktion bereits optimiert werden, um eine genügend große Menge von Protein für die Funktionalitätstests im Zellkultur- und Bilayer-System sowie für die Kristallisierung zu Verfügung zu haben. 2. Clostridium perfringens Epsilon-Toxin besteht aus einem einzelnen Protein. Es handelt sich wahrscheinlich um ein reines Cytolysin, das die Membranintegrität durch die Bildung von definierten Kanälen zerstört. Es wird vermutet, dass sich das Toxin aus sieben Untereinheiten zusammensetzt. Die Struktur des Monomers konnte aufgeklärt werden und ähnelt der des Aerolysins von Aeromonas hydrophila. Obwohl sich der Wirkmechanismus von dem des Iota-Toxins unterscheidet, besitzen beide eine hohe Sequenzhomologie in den potentiellen Transmembranbereichen. Durch Mutationen und deren anschließender elektrophysiologischer Charakterisierung soll nachgewiesen werden, dass es sich hierbei tatsächlich um die Membrandomäne handelt.

Vielen 病原体细菌与蛋白质毒素的产生有关。真核细胞内的毒素会在细胞内发生修饰。大范围的转运蛋白和毒素分子在文化媒介中是分开的。 Ziel 项目是通过运输蛋白质结构来实现运输功能的。我对毒素的了解如下： 1. 产气荚膜梭状芽胞杆菌 Iota-Toxin besteht aus zwei voneinander unabhängigen Proteinen。 Iota-a (Ia) 是酶的功能，Iota-b (Ib) 是酶结合和运输的酶组件，位于 Zielzelle verantwortlich ist 中。 Der für diesen Transportprozess verantwortliche Mechanismus der Bindekomponente soll mit Hilfe von Punkt- Bzw。 Zellkultur- 和 Black-Lipid-Bilayerexperimenten aufgeklärt werden 中的 Kassettenmutanten。 Des Weiteren soll die Iota-Toxin-Produktion bereits optimiert werden, um eine genügend große Menge von Protein for die Funktionalitätäts im Zellkultur- und Bilayer-System sowie für die Kristallisierung zu Verfügung zu haben. 2. 产气荚膜梭菌 Epsilon 毒​​素 besteht aus einem einzelnen 蛋白质。这是细胞溶解素的处理方式，它是细胞膜完整性的定义。这是一种有毒的毒素，它是有毒的。单体的结构与嗜水气单胞菌的气溶素有关。 Obwohl sich der Wirkmechanismus von dem des Iota-Toxins unterscheidet, besitzen beide eine hohe Sequenzhomologie in den pottierlen Transmembranbereichen.突变和电生理学特性在我们的操作中是非常重要的。