Neue Methoden zur Laser-Mikrodissektion und zum berührungslosen Transport von Gewebeproben und Lebendzellen für molekularbiologische Analysen

用于分子生物学分析的组织样本和活细胞激光显微切割和非接触式传输的新方法

• 批准号: 15539625
• 负责人: Professor Dr. Andreas Gebert
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biomedizinische Optik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/15539625?language=en
• 关键词: Neue; Methoden; zur; Laser; Mikrodissektion

Durch Laser-Mikrodissektion (LMD) und Laser-Pressure-Catapulting (LPC) werden aus histologischen Gewebeschnitten mikroskopische Proben berührungslos gewonnen und danach molekularbiologisch analysiert. Die derzeitige technische Realisation von LMD und LPC erreicht bei weitem nicht die theoretischen optischen Möglichkeiten, belastet die Proben thermisch sowie durch UV-Bestrahlung und ist nur bedingt mit modernen Methoden der Immunfluoreszenz kombinierbar. Im Projekt sollen neue Wege zum schonenderen und gleichzeitig präziseren optischen Schneiden und Katapultieren entwickelt werden. Dazu sollen (1) die zu Grunde liegenden physikalischen Prozesse charakterisiert werden, (2) die bislang benutzte Trägerfolie durch neu zu entwickelnde Beschichtungen ersetzt werden, (3) die LMD- und LPC-Verfahren laseroptisch erweitert werden, (4) die Wirkung auf biologisches Gewebe durch real-time RT-PCR für Gewebs-mRNA vergleichend quantifiziert werden sowie (5) die Isolation von Lebendzellen und Mikrovolumina durch LPC erprobt werden. Durch das Projekt sollen Grundlagen für Techniken geschaffen werden, die es erlauben, in heterogenen Geweben definierte Einzelzellen mit hoher Empfindlichkeit zu detektieren, bei maximaler Schonung zu isolieren und so einer optimalen molekularbiologischen Analyse zugänglich zu machen.

微镜下激光（LMD）和激光压力催化（LPC）韦尔登通过组织学微镜检查和分子生物学分析获得。LMD和LPC的技术实现并非理论上的光学成像，而是通过紫外线照射产生的热效应，并且仅仅是采用了现代免疫荧光技术。Im Projekt sollen neue Wege zum schonenderen und gleichzeitig präziseren optischen Schneiden und Katapultieren entwickelt韦尔登.主要解决（1）基础物理过程的特点韦尔登，（2）新方法的激光治疗的优点韦尔登，（3）LMD-和LPC-激光光学的优点韦尔登，（4）通过实时荧光定量RT-PCR检测生物学中的Gewebs-mRNA（5）Lebendzellen和Mikrovolumina的隔离通过LPC错误的韦尔登。由于该项目是韦尔登技术基础，因此它是一个非均匀的几何定义，具有更高的确定性，最大限度地提高了隔离度，并使分子生物学分析达到最佳。