Neue Methoden zur Laser-Mikrodissektion und zum berührungslosen Transport von Gewebeproben und Lebendzellen für molekularbiologische Analysen

用于分子生物学分析的组织样本和活细胞激光显微切割和非接触式传输的新方法

• 批准号: 15539625
• 负责人: Professor Dr. Andreas Gebert
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biomedizinische Optik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/15539625?language=en
• 关键词: Neue; Methoden; zur; Laser; Mikrodissektion

Durch Laser-Mikrodissektion (LMD) und Laser-Pressure-Catapulting (LPC) werden aus histologischen Gewebeschnitten mikroskopische Proben berührungslos gewonnen und danach molekularbiologisch analysiert. Die derzeitige technische Realisation von LMD und LPC erreicht bei weitem nicht die theoretischen optischen Möglichkeiten, belastet die Proben thermisch sowie durch UV-Bestrahlung und ist nur bedingt mit modernen Methoden der Immunfluoreszenz kombinierbar. Im Projekt sollen neue Wege zum schonenderen und gleichzeitig präziseren optischen Schneiden und Katapultieren entwickelt werden. Dazu sollen (1) die zu Grunde liegenden physikalischen Prozesse charakterisiert werden, (2) die bislang benutzte Trägerfolie durch neu zu entwickelnde Beschichtungen ersetzt werden, (3) die LMD- und LPC-Verfahren laseroptisch erweitert werden, (4) die Wirkung auf biologisches Gewebe durch real-time RT-PCR für Gewebs-mRNA vergleichend quantifiziert werden sowie (5) die Isolation von Lebendzellen und Mikrovolumina durch LPC erprobt werden. Durch das Projekt sollen Grundlagen für Techniken geschaffen werden, die es erlauben, in heterogenen Geweben definierte Einzelzellen mit hoher Empfindlichkeit zu detektieren, bei maximaler Schonung zu isolieren und so einer optimalen molekularbiologischen Analyse zugänglich zu machen.

Durch 激光微解剖 (LMD) 和激光压力弹射 (LPC) 技术可用于组织学研究和分子生物学分析。 LMD 和 LPC 的技术实现是基于理论优化的，可以通过 UV 优化进行热敏试验，并与现代免疫荧光方法相结合。 Im Projekt sollen neue Wege zum schonenderen 和 gleichzeitig präziseren optischen Schneiden und Katapultieren entwickelt werden。 Dazu sollen (1) die zu Grunde liegenden phykalischen Prozesse charakterisiert werden, (2) die bislang benutzte Trägerfolie durch neu zu entwickelnde Beschichtungen ersetzt werden, (3) die LMD- und LPC-Verfahren Laseroptisch erweitert werden, (4) 在实时 RT-PCR 中对 Gewebs-mRNA 进行生物分析，以进行定量 (5) 在 LPC 错误中进行 Lebendzellen 和 Mikrovolumina 的分离。技术方案的基本原理、技术原理、设计方法、异种结构定义和技术分析、分子生物学分析的最大化 zugänglich zu machen。