Gewinnung von pharmakologisch relevanten Triterpenen aus pflanzlichen Zellkulturen am Beispiel von Olenanol- und Ursolsäure

以齐墩果酸和熊果酸为例，从植物细胞培养物中获取药理学相关的三萜

• 批准号: 160197849
• 负责人: Professor Dr. Thomas Bley
• 金额: --
• 依托单位: Lehrgebiet Bioverfahrenstechnik (BioVT)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2008-12-31 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/160197849?language=en
• 关键词: Gewinnung; von; pharmakologisch; relevanten; Triterpenen

Die Stoffgruppe der Triterpene rückt vermehrt in den Fokus pharmazeutischer Untersuchungen. So betrug der Weltmarkt für Wirkstoffe aus Pflanzen im Jahr 2002 rund 30.7 Mrd. US$, wobei die Substanzklasse der Terpene den dominierenden Anteil und die höchsten jährlichen Wachstumsraten hat. Die Triterpene werden in der Regel aus verschiedenen Pflanzenmaterialien isoliert und gegebenenfalls für pharmazeutische Anwendungen chemisch modifiziert. Durch dieses Vorgehen ergeben sich mehrere Nachteile. So unterliegt die Rohstoffversorgung starken Schwankungen in Qualität und Quantität, da der Anbau von Medizinalpflanzen von der Witterung abhängig ist. Bei der chemischen Modifikation entsteht eine Vielzahl von unerwünschten Nebenprodukten, die aufwändig vom eigentlichen Produkt abgetrennt werden müssen bzw. sind einige erwünschte Modifikationen auf chemischem Wege nur sehr schwer oder gar nicht zugänglich. Im beantragten Projekt soll daher untersucht werden, inwieweit über pflanzliche Zellkulturen (Salbei und Ginseng) Triterpene in ausreichender Quantität und Qualität unter reproduzierbaren Bedingungen hergestellt werden können. Analysen der DNA Profile mittels Flow Cytometry sollen die Auswahl der Zelllinien begleiten. Es soll untersucht werden, ob durch die Transformation der Pflanzenzellen zu in 3 vitro Kulturen Veränderungen auftreten und ob diese gegebenenfalls Ruckschlüsse über Wachstumsraten, Ausbeuten und/oder Morphologie der Kulturen zulassen. Biparametrische Zellzyklusanalysen von Kultivierungsprozessen sollen Aufschluss über die Heterogenität der Zellekulturen und damit verbundene Änderungen der Wachstumsraten geben. Weiterhin soll untersucht werden, ob die Ergebnisse dieser Analysen mit Veränderungen der Metabolitkonzentrationen bzw. -profile korrelieren. Mit Hilfe molekulargenetischer Ansätze soll die Kohlenhydrataufnahmekapazität und deren zellinterne Verteilung in transgenen Salbeizellinien optimiert und damit die Triterpenausbeute zusätzlich gesteigert werden. Gegenstand des Projektes sind weiterhin Untersuchungen zur Modifikationen der Triterpene über Biotransformationen mit Ganzzellsystemen und mit isolierten Enzymen. Das Vorhaben fokussiert dabei auf die beiden Triterpene Olenaol- und Ursolsäure, da diese mit zu den wirksamsten Vertretern dieser Substanzklasse zu zählen sind. Sie verfügen über eine Vielzahl von pharmakologischen Wirkungen. Zielstellung ist Etablierung eines Gesamtprozesses, der die Schritte Kultivierung und Produktbildung sowie die Aufarbeitung und die Biotransformation der Triterpene in einer biotechnologischen Miniplant-Anlage vereint. Anhand der hierbei erzielten Prozessdaten soll eine Modellierung des Gesamtprozesses am Beispiel der Fermentation einer Salbeizelllinie mit anschließender Veresterung durch Norcardia NL5646 erfolgen. Mit Hilfe des Prozessmodells soll die Maßstabsübertragung der einzelnen Prozessparameter und damit ein entsprechendes Up-Scaling ermöglicht werden. Die Effektivitätssteigerung durch den Einsatz transgener Zellinien wird dabei eingehend untersucht.

三萜类化合物在药物研究中的应用。因此，2002年全年从普夫兰岑进口的Wirkstoffe的世界市场为30.7 Mrd。以美元计，萜烯的主要成分是丙烯和最大的消费量。三萜类化合物韦尔登在法规中的定义是从异构体中分离出来的，并对药物进行化学修饰。这是一个非常有趣的故事。因此，在质量和数量上，从医疗安包中提取的维生素是必要的。在化学改性后，可获得一种新的产品，从而使原有的产品得到韦尔登。sind einige erwünschte Modifikationen auf chemischem Wege努尔sehr schwer or der gar nicht zugänglich.在一个很好的韦尔登栽培项目中，我们将通过韦尔登栽培品中三萜的含量和质量来进行再生产。流式细胞术是一种DNA图谱分析方法。这是一个韦尔登，通过体外培养的Pflanzenzellen的转化来实现的。对多元文化过程的双参数Zellzyklusanalysen sollen Aufschluss über die Heterogenität der Zellekulturen und damit verbundene Änderungen der Wachstumsraten geben. Weiterhin soll untersucht韦尔登，ob die Ergebnisse dieser Analysen mit Veränderungen der Metabolitkonzentrationen bzw. - 侧写korrelieren。Mit Hilfe molekulargenetischer Ansätze soll die Kohlenhydrataufnahmekapazität und deren zellinterne Verteilung in transgenen Salbeizellinien optimiert und damit die Triterpenausbeute zusätzlich gesteigert韦尔登.本课题的研究重点是利用Ganzzellsystemen和Isolierten Enzymen对三萜类化合物进行生物转化的研究。Das Vorhaben fokussiert dabei auf die beiden Tripenese Olenaol- und Ursolsäure，da diese mit zu den Escherksamsten Vertretern dieser Substanzklasse zu zählen sind.您需要一份关于药理学的文件。该方法是在一个生物技术微型工厂----原产地中进行三萜类化合物的合成、培养和生物转化的一种方法。因此，这两个过程的数据需要建立一个发酵过程的模型，该过程是通过诺卡氏菌NL 5646进行的。Mit Hilfe des Prozessmodels soll die Maßstabsübertragung der einzelnen Prozessparameter und damit ein entsprechendes Up-Scaling ermöglicht韦尔登韦尔登.通过一个简单的转基因Zellinien的有效性将被理解。