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Technologieplattform für Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie

荧光相关光谱技术平台

基本信息

批准号：
181329935
负责人：
Professor Dr. Jochen Guck
金额：
--
依托单位：
Max-Planck-Institut für die Physik des Lichts
依托单位国家：
德国
项目类别：
Clinical Research Units
财政年份：
2010
资助国家：
德国
起止时间：
2009-12-31 至 2017-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/181329935?language=en
关键词：
Technologieplattform Fluoreszenz Korrelations Spektroskopie

项目摘要

Dieses Teilprojekt beinhaltet die Bereitstellung, Betreuung und technische Weiterentwicklung einer Technologieplattform, die eine völlig neue Messtechnologie in das Konsortium einbringen wird. Die Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie (FCS) und Fluoreszenz- Kreuzkorrelations-Spektroskopie (FCCS) sind etablierte Methoden, mit deren Hilfe auf Einzelmolekülebene Konzentrationen, Mobilitäten und Interaktionen zwischen verschiedenen fluoreszenzmarkierten Molekülen in beliebigen wässrigen Umgebungen und dadurch auch in lebenden Zellen sowie Organismen in Echtzeit bestimmt werden können. In gewisser Hinsicht kann man FCS/FCCS also als eine Methode zur Bestimmung der in-situ Biochemie bzw. Proteomik verstehen. Im Gegensatz zu anderen fluoreszenzbasierenden Interaktionsmethoden wie Ko-Lokalisation oder Fluoreszenz-Resonanz-Energietransfer (FRET) ist FCCS sehr viel spezifischer und weniger abhängig von der genauen Positionierung der Fluoreszenzfarbstoffe innerhalb der Moleküle. In der hier beantragten Klinischen Forschergruppe soll FCS/FCCS als eine innovative, zur (konfokalen) Bildgebung orthogonale bzw. komplementäre Methode eingesetzt werden, um neue und mehr quantitative Analyseparameter zu den jeweiligen biomolekularen Systemen zu erschließen. Hierbei stehen insbesondere molekulare Interaktionen zwischen verschiedenen Protein-sowie Nukleinsäure-Spezies im Vordergrund. Die bisher etablierten Verfahren erlauben es, bis zu zwei verschiedene Molekülspezies in kommerziellen FCS-Instrumenten und bis zu drei verschiedene Spezies in Eigenbauten der AG Schwille zu untersuchen. Ziel dieses Teilprojektes ist neben der Unterstützung der Teilprojekte an einem Turnkey-Instrument der Dresdner Technologieplattform auch die methodischen Grundlagen für eine zukünftige Implementation der Dreifarben- (Drei-Komponenten-) Anwendungen in Zellen zu legen.

Dieses Teilprojekt beinhaltet die Bereitstellung，Betreuung und technische Weiterentwicklung einer Technologieplattform，die eine völlig neue Mestechnologie in das Konstelling einbringen wird. FCS和FCCS是一种可靠的方法，它通过一种特殊的药物治疗、流动性和相互作用来验证荧光标记分子，从而使韦尔登中的有机体得到确认。FCS/FCCS也是一种原位生物化学测定方法。Proteomik verstehen.在Ko-定位或共振能量转移（FRET）等荧光基相互作用方法中，FCCS具有很强的特异性，并且对分子内固定物的一般定位具有很强的吸引力。FCS/FCCS是一种创新的、正交的（协调）结构。komplementäre Methode eingesetzt韦尔登，um neue und梅尔quantitative Analysisplementation zu den jeweiligen biomolekularen Systemen zu erschließen.在前体中，这些分子相互作用可以使蛋白质-sowie Nukleinsäure-Spezies相互作用。Bisher etablierten Verfahren erlauben es，bis zu zwei verzedene Molekülspezies in kommerziellen FCS-Instrumenten and bis zu drei verzedene Spezies in Eigenbauten der AG Schwille zu untersuchen. Ziel dieses Teilprojektes ist neben der Unterstützung der Teilprojekte an einem Turnkey-Instrument der Drescent Technologieplattform auch die methodischen Grundlagen für eine zukünftige Implementation der Dreifarben-（Drei-Komponenten-）Anwendungen in Zellen zu legen.