Funktionelle Charakterisierung der Interaktion zwischen dem Multidrug Resistenz 1 Protein und Caveolin 1 und deren Bedeutung für die Radioprotektion von Normalgewebszellen

多药耐药1蛋白与caveolin 1相互作用的功能表征及其对正常组织细胞辐射防护的意义

• 批准号: 206439243
• 负责人: Privatdozent Dr. Carsten Herskind
• 金额: --
• 依托单位: Universitätsklinikum Freiburg
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2011-12-31 至 2014-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/206439243?language=en
• 关键词: Funktionelle; Charakterisierung; der; Interaktion; zwischen

Das Multidrug Resistenz 1 (MDR1) Gen schützt durch seine Efflux-Pumpenfunktion nicht nur gegenüber verschiedenen Chemotherapeutika, sondern vermittelt auch Schutz gegenüber durch ionisierende Strahlung induzierte Apoptose. Das ebenfalls in der Zellmembran lokalisierte Caveolin 1 (CAV1) ist dort an der Bildung von Cavolae und Membranvesikeln beteiligt und gilt in Normalzellen als Tumorsuppressor. Allerdings ist die Expression häufig in fortgeschrittenen Tumoren erhöht, und CAV1 kann dort als Resistenzfaktor gegenüber ionisierender Strahlung wirken. Mehrere Studien weisen auf eine enge Verbindung zwischen MDR1 und CAV1 hin. So sind beide Gene oft gleichzeitig in Tumorzellen gegenüber den entsprechenden Normalgewebszellen verstärkt exprimiert. Außerdem wird die Transportfunktion von MDR1 über die Phosphorylierung von CAV1 reguliert. In eigenen Vorarbeiten haben wir die humane lymphoblastoide TK6-Zelllinie, die endogen weder MDR1 noch CAV1 exprimiert, als ein In-vitro-Modellsystem verwendet, das nach lentiviraler Transduktion entweder MDR1 oder CAV1 stabil exprimiert. Damit konnten wir zeigen, dass Überexpression von MDR1 die strahleninduzierte Apoptose unterdrückt und zu einem verbesserten klonogenen Überleben führt. Die Überexpression von CAV1 unterdrückt dagegen die frühe strahleninduzierte Apoptose, was in einer verstärkten Proliferation resultiert, aber das klonogene Überleben nicht steigert. Als Kontrolle für die CAV1-spezifische Funktion haben wir einen lentiviralen shRNA-Vektor für den spezifischen Knockdown von CAV1 kloniert und erfolgreich validiert. Ziele des Projektes sind• Untersuchung der Mechanismen der Interaktion zwischen MDR1 und CAV1 bei der Radioresistenz• Funktionelle Untersuchungen zur Inhibition der Apoptose durch MDR1 und CAV1: Bedeutung vonMDR1 für die radioresistente Wirkung von CAV1 sowie die Regulierung der antiapoptotischenFunktion von MDR1 durch CAV1• Ermittlung der Relevanz der Phosphorylierung von CAV1 (CAV1Y14F) für die Interaktion mit MDR1und dessen Funktionalität• Studien zur (Ko)-Lokalisierung von MDR1 und CAV1 in der Zellmembran/in Organellmembranen

Das多药耐药基因1 (MDR1) Gen Schutz durch seine外排- pumpenfunktion nicht nur gegenen ber verschiedenen Chemotherapeutika， sondertelt auch Schutz gegen<e:1> ber durch ionisierende Strahlung industrierte凋亡。在正常的肿瘤抑制因子中，细胞内膜腔蛋白1 （CAV1）和细胞内膜腔蛋白1 （CAV1）在正常的肿瘤抑制因子中均有表达。致敏因子与基因表达häufig在fortgeschrittenen tumor erhöht， and CAV1 kann - ort; resistance faktor gengen; ber ionisierender Strahlung wirken。mehere研究小组研究了MDR1和CAV1基因的遗传变异。因此，在肿瘤中发现glichzeitig基因；在肿瘤中发现glichzeitig基因；小鼠MDR1转运功能<e:1>与小鼠CAV1磷酸化调控作用的关系。本研究采用人淋巴母细胞样细胞TK6-Zelllinie、MDR1与CAV1的内源性结合实验、体外模型系统实验，以及MDR1与CAV1的慢病毒转导稳定实验。链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：Die Überexpression von CAV1 underdr<e:1> ckt dagegen Die fr<e:1> strahlenindustrierte凋亡，是在einer verstärkten增殖结果，aber das klonogene Überleben nicht steigert。Als Kontrolle毛皮死CAV1-spezifische Funktion有我们杯lentiviralen shRNA-Vektor毛皮窝spezifischen击倒冯CAV1 kloniert和erfolgreich validiert。MDR1和CAV1的相互作用机制；MDR1和CAV1的抗辐射功能；MDR1和CAV1的凋亡抑制；Bedeutung vonMDR1 f<e:1> r die radiresistant Wirkung von CAV1 sowie die regullierung der antiapoptosis schenfunktion vonMDR1 durch CAV1•Ermittlung der Relevanz der phospylierung von CAV1 (CAV1Y14F) f<e:1> r die Interaktion mit MDR1und dessen Funktionalität•Studien zur (Ko)-Lokalisierung vonMDR1 und CAV1 in der zellmembrane /in organellmembrane