Molekulare und funktionelle Charakterisierung von Stamm- und Progenitorzellen der menschlichen Hornhaut

人角膜干细胞和祖细胞的分子和功能表征

• 批准号: 240204035
• 负责人: Professor Dr. Hannes Klump, Ph.D.
• 金额: --
• 依托单位: Klinik für Augenheilkunde
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2012-12-31 至 2016-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/240204035?language=en
• 关键词: Molekulare; und; funktionelle; Charakterisierung; von

Bei vielen Erkrankungen der Augenoberfläche stellt die Stammzellinsuffizienz, die aus dem Verlust der epithelialen Stammzellpopulation der Hornhaut resultiert, ein charakteristisches Merkmal dar. In diesem Fall ist eine chirurgische Erneuerung der Stammzellpopulation durch Transplantation von humanen, im Rahmen eines Tissue-Engineering auf Amnionmembran (AM) expandierten, limbalen Stamm- und Progenitorzellen (LSPZ) auf die Hornhautoberfläche erforderlich. Eine Methode zur Züchtung von LSPZ auf AM wird in der Universitäts-Augenklinik Essen angewandt. Aus wenigen LSPZ, gewonnen aus einer autologen Limbusbiopsie, wird ein transplantationsfähiges Epithel erzeugt. Das Kultursystem ist frei von nicht humanen Substanzen und Zellen. Die Transplantation dieses Limbusepithels führt aber nur in rund 77% der behandelten Fälle zur Stabilisierung der Hornhautoberfläche. Es bleibt unklar, warum in ca. 23% der Fälle ein Transplantatversagen auftritt. Eine Erklärung ist die bisher fehlende aussagekräftige Qualitätsmessung des in vitro generierten Grafts und ein unvollständiges Verständnis der Interaktion der LSPZs mit ihrer Nische, die bei der Zellkultur durch die verwendete AM simuliert wird. Die Qualität der Zellkulturen sollte primär über den dauerhaften Erhalt der LSPZs in vitro definiert werden. Da bis heute ein eindeutiger Biomarker für LSPZs fehlt, wird zu deren Charakterisierung eine Kombination verschiedener Eigenschaften herangezogen. Das hier vorgestellte Projektvorhaben soll sowohl das Verständnis der Stammzellcharakteristika der LSPZs erweitern, als auch den Einfluss der Nische untersuchen. Ziel ist es die Qualität der Zellkultur zu verbessern. Subpopulationen von LSPZs sollen mittels Durchflusszytometrie aus limbalen Zellkulturen isoliert und funktionell charakterisiert werden. Anschließende Microarrayanalysen der so angereicherten Zellen sollen helfen Kandidatengene für limbale “Stemness“ zu finden. Deren Relevanz soll dann mittels ektoper Expression und funktioneller Analyse validiert werden. Durch die Verwendung von unterschiedlich aufbereiteter AM bei der Kultivierung der Zellen, sowohl intaktem als auch deepithelisiertem Gewebe, soll der Einfluss von Faktoren des amniotischen Epithels auf die Ausbildung der Charakteristika der LSPZ untersucht werden.

由于许多新生儿的消化道感染，从Hornhaut的上皮细胞中产生的Stammzellinfizienz，具有Merkmal的特征。今年秋天，通过人的移植，我们进行了一项组织工程，以扩张羊膜（AM），使Stamm- und Progenitorzellen（LSPZ）与Hornhautoberfläche融合。在埃森大学的临床实验室中，我们将采用一种方法来提高LSPZ的水平。从LSPZ开始，从一个自体的肢体活检中，我们可以移植一个更大的上皮细胞。文化体系并不自由于人的物质和精神。Die Transplantation dieses Limbusepithels führt aber努尔in rund 77% der behandelten Fälle zur Stabilisierung der Hornhautoberfläche.很明显，这是在ca。23%的女性接受移植。Eine Erklärung ist die bisher fehlende aussagekräftige Qualitätsmessung des in vitro generierten Grafts and ein unvollständiges Verständnis der Interaktion der LSPZ mit ihrer Nische，die bei der Zellkultur durch die verwendete AM simuliert wird. Die Qualität der Zellkulturen sollte primär über den dauersparten Erhalt der LSPZs in vitro definiert韦尔登。到目前为止，LSPZ的一个生物标志物已经消失，将形成一个特征性的特征性组合。这一项目的目的是为了更好地理解LSPZs的Stammzellcharakteristika，也是为了更好地影响Nische。Ziel is die Qualität der Zellkultur zu verbessern. LSPZs的亚群可以通过边缘的Zellkulturen isoliert和功能特性韦尔登来测定。AnschließenTM Microarrayanalysen der so angereicherten Zellen sollen helfen Kandidatengene für limbale“Stemness”zu finden.所有相关性都必须通过有效的外部表达和功能分析韦尔登。尽管在Zellen的多层次结构中对AM进行了深入的研究，但也有一些深入的研究，这是由于LSPZ的特征对语言文字的影响。