Molekulare und funktionelle Charakterisierung von Stamm- und Progenitorzellen der menschlichen Hornhaut
人角膜干细胞和祖细胞的分子和功能表征
基本信息
- 批准号:240204035
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2013
- 资助国家:德国
- 起止时间:2012-12-31 至 2016-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Bei vielen Erkrankungen der Augenoberfläche stellt die Stammzellinsuffizienz, die aus dem Verlust der epithelialen Stammzellpopulation der Hornhaut resultiert, ein charakteristisches Merkmal dar. In diesem Fall ist eine chirurgische Erneuerung der Stammzellpopulation durch Transplantation von humanen, im Rahmen eines Tissue-Engineering auf Amnionmembran (AM) expandierten, limbalen Stamm- und Progenitorzellen (LSPZ) auf die Hornhautoberfläche erforderlich. Eine Methode zur Züchtung von LSPZ auf AM wird in der Universitäts-Augenklinik Essen angewandt. Aus wenigen LSPZ, gewonnen aus einer autologen Limbusbiopsie, wird ein transplantationsfähiges Epithel erzeugt. Das Kultursystem ist frei von nicht humanen Substanzen und Zellen. Die Transplantation dieses Limbusepithels führt aber nur in rund 77% der behandelten Fälle zur Stabilisierung der Hornhautoberfläche. Es bleibt unklar, warum in ca. 23% der Fälle ein Transplantatversagen auftritt. Eine Erklärung ist die bisher fehlende aussagekräftige Qualitätsmessung des in vitro generierten Grafts und ein unvollständiges Verständnis der Interaktion der LSPZs mit ihrer Nische, die bei der Zellkultur durch die verwendete AM simuliert wird. Die Qualität der Zellkulturen sollte primär über den dauerhaften Erhalt der LSPZs in vitro definiert werden. Da bis heute ein eindeutiger Biomarker für LSPZs fehlt, wird zu deren Charakterisierung eine Kombination verschiedener Eigenschaften herangezogen. Das hier vorgestellte Projektvorhaben soll sowohl das Verständnis der Stammzellcharakteristika der LSPZs erweitern, als auch den Einfluss der Nische untersuchen. Ziel ist es die Qualität der Zellkultur zu verbessern. Subpopulationen von LSPZs sollen mittels Durchflusszytometrie aus limbalen Zellkulturen isoliert und funktionell charakterisiert werden. Anschließende Microarrayanalysen der so angereicherten Zellen sollen helfen Kandidatengene für limbale “Stemness“ zu finden. Deren Relevanz soll dann mittels ektoper Expression und funktioneller Analyse validiert werden. Durch die Verwendung von unterschiedlich aufbereiteter AM bei der Kultivierung der Zellen, sowohl intaktem als auch deepithelisiertem Gewebe, soll der Einfluss von Faktoren des amniotischen Epithels auf die Ausbildung der Charakteristika der LSPZ untersucht werden.
Bei vielen Erkrankungen der Augenoberfläche stellt die Stammzellinsuffizienz, die aus dem Verlust der 上皮细胞 Stammzellpopulation der Hornhaut resultiert, ein 特征 Merkmal dar。在秋季,人类移植中的斯塔姆泽尔人口的外科手术,是在羊膜 (AM) 扩张、角膜缘斯塔姆和祖细胞 (LSPZ) 的组织工程中进行的。 LSPZ 的 Züchtung 方法是在埃森大学奥根诊所进行的 AM 操作。 Aus wenigen LSPZ,gewonnen aus einer autologen Limbusbiopsie,wird ein 移植 fähiges 上皮细胞 erzeugt。 Das Kultursystem ist frei von nicht humanen Substanzen und Zellen。移植使 Limbusepithels führt aber nur 在 rund 77% der behandelten Fälle zur Stabilisierung der Hornhautoberfläche。 Es bleibt unklar,warum 在约。 23% der Fälle ein Transplantatversagen auftritt。 Eine Erklärung ist die bisher fehlende aussagekräftige Qualitätsmessung des 体外通用移植物 and ein unvollständiges Verständnis der Interaktion der LSPZs mit ihrer Nische, die bei der Zellkultur durch die verwendete AM simuliert wird. Die Qualität der Zellkulturen sollte primär über den dauerhaften Erhalt der LSPZs in IV 体外定义。这是 LSPZ 的生物标志物,它具有特征组合和特征组合。 Das hier vorgestellte Projektvorhaben soll das Verständnis der Stammzellcharakteristika der LSPZs erweitern, as auch den Einfluss der Nische undersuchen. Ziel 是 Zellkultur zu verbessern 的质量。 LSPZ 的亚群在边缘区域具有不同的特征和功能。 Anschließende Microarrayanalysisn der soangereicherten Zellen sollen helfen Kandidatengene für limbale “Stemness” zu finden。 Deren Relevanz soll dann mittels ektoper Expression und funktioneller 分析有效的操作。在泽伦文化的影响下,羊膜上皮的形成和羊膜上皮的形成都与 LSPZ 的特性有关。
项目成果
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Professor Dr. Hannes Klump, Ph.D.其他文献
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