Untersuchungen zur strukturellen Dynamik der AAA+ ATPase p97 in unterschiedlichen funktionellen Zuständen

不同功能状态下 AAA ATPase p97 的结构动力学研究

基本信息

项目摘要

p97 (auch Cdc48 und VCP genannt) ist eine Chaperon-ähnliche, hexamere molekulare Maschine der AAA+ Familie, welche in der Lage ist, durch Hydrolyse von ATP gewonnene chemische Energie in mechanische umzuwandeln. In der Zelle vermittelt p97 im Zusammenspiel mit Substrat-rekrutierenden und -prozessierenden Kofaktoren die proteasomale Degradation von fehlgefalteten Proteinen des Endoplasmatischen Reticulums (ERAD) und homotypische Membranfusionsprozesse. p97 ist in allen Eukaryoten essenziell, und Mutationen im p97-kodierenden Gen des Menschen verursachen familiäre Proteinopathien. Obschon einzelne strukturelle „Schnappschüsse“ von p97 während des ATPase Zyklus existieren, sind sowohl der Mechanismus als auch die Konformationslandschaft von funktionellen Zuständen dieser dynamischen molekularen Maschine weitgehend unverstanden. Ziel dieses Vorhabens ist es, die funktionellen Raumstrukturen von p97 in unterschiedlichen Stadien des ATPase-Zyklus durch hochauflösende Kryo-Elektronmikroskopie zu bestimmen. Insbesondere wird untersucht, wie der Konformationsraum von p97 während des ATPase-Zyklus durch die Bindung unterschiedlicher Kofaktoren beeinflusst wird. Darauf aufbauend soll untersucht werden, welchen Einfluss Proteinopathie verursachenden Mutationen auf den Konformationsraum von p97 ausüben. Schließlich soll das Wechselspiel der einzelnen Ensembles von Konformeren während eines ATPase- Zyklus durch zeitaufgelöste Kryo-Elektronenmikroskopie analysiert werden. Die gewonnen Einsichten werden maßgeblich zum Verständnis der Funktionsweise von p97 und ihrer Beeinträchtigung durch krankheitsverursachende Mutationen beitragen.
P97(Auch CDC48 And VCP Genannt)是分子伴侣,是AAA+家族中的六聚体分子,在此基础上,继续水解von ATP的化学能。在der Zelle vermittelt p97中,ZusammenSpiel MIT底物-rekrutierenden and-prozessierenden Kofaktoren die蛋白酶体降解von fehlgefalteen Proteinen des Endoplatimatschen Reitum(ERAD)and Homotype ische Memmenfusionsprozesse。P97是在Allen Eukaryoten essenziell,and Mutationen im p97-kodierenden Gen des Menschen verursachen Family iäre Proteinopathien。在此基础上,提出了一种新的解决方案--“Schnappschüsse”von p97 während des ATPase Zyklus Existieren,sind sowohl der machisismus以及schaft von Funktionellen zuständen dieser Dynamisischen molekularen Maschine weitgehend unververstain.他说:“我不知道你的名字是什么,我不知道你是谁。”在这里,我们将看到一种新的方式,即一种新的方式,即一种新的方式。他说:“我不知道这是怎么回事,因为这是一种疾病。”Schlie?lich soll das WechselSpiel der einzelnen合奏von Konformeren während eines ATPase-Zyklus Durch zeitaufelöste Kryo-Elektronenmikroskopie analysiert他说:“我不知道你的名字是什么意思。”

项目成果

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