Funktionelle Bedeutung der tandemartigen Anordnung der SNARE-Motive in SNAP-25 im Kontext der schnellen, Ca2+-abhängigen Exozytose

SNARE 基序在 SNAP-25 中串联排列在快速、Ca2+ 依赖性胞吐作用中的功能意义

• 批准号: 218346420
• 负责人: Professor Dr. Ralf Mohrmann
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Physiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2011-12-31 至 2016-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/218346420?language=en
• 关键词: Funktionelle; Bedeutung; der; tandemartigen; Anordnung

Das an der Exozytose beteiligte SNARE (soluble N-ethylmaleimide-sensitive-factor attachment receptor)-Protein SNAP-25 weist durch eine tandemartige Verknüpfung von zwei SNARE-Motiven ein strukturelles Merkmal auf, das funktionell wenig verstanden ist. Evolutionär scheint aus zwei getrennten membranverankerten SNARE-Proteinen mit einzelnen SNARE-Motiven ein membranassoziiertes Protein gebildet worden zu sein, in dem die beiden Motive über einen mit Palmitoylierungsstellen ausgestatteten „Linker“ verknüpft sind. Im hier vorgeschlagenen Projekt sollen die mechanistischen Gründe dieser Anpassung im Kontext der schnellen, regulierten Exozytose analysiert werden. Dazu sollen verschiedene Charakteristika der „Linker“-Struktur manipuliert, und die funktionellen Konsequenzen für die Vesikelfusion untersucht werden. „Linker“-Länge, Integrität, sowie die relative Position der Palmitoylierungsstellen und der Palmitoylierungsgrad sollen als potentielle Einflußgrößen auf die Sekretionsfähigkeit untersucht werden. Mutierte SNAP-25-Varianten sollen hierbei in Snap-25-/-- Chromaffinzellen mit Hilfe eines viralen Expressionssystems exprimiert werden, um die rekonstituierte Sekretion mittels zeitlich hochauflösender elektrophysiologischer Methoden auf Änderungen in den Freisetzungseigenschaften zu analysieren. Lokalisationseffekte aufgrund veränderter Palmitoylierungsmuster sollen anhand von Fluorophor-markierten SNAP-25-Fusionproteinen untersucht werden.

作为一个外切酶SNARE（可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着受体）-蛋白SNAP-25通过两个SNARE-Motiven一个Merkmal结构的串联连接，这些功能可以被理解。Evolutionär scheint aus zwei getrennten membranverankerten SNARE-Proteinen mit einzelnen SNARE-Motiven ein membranassoziertes Protein gebildet沃登zu sein，in dem beiden Motive über einen mit Palmitoylierungsstellen ausgestatteten“Linker”verknüpft sind.在消化道项目中，通过对消化道内分泌物的分析，确定了消化道内分泌物的消化机制，并对韦尔登进行了调节。Dazu sollen vercedene Charakteristika der“Linker”-Struktur manipuliert，und die funktionellen Konsequenzen für die Vesikelfusion untersucht韦尔登.“连接器”-Länge，Integrität，sowie die relative Position der Palmitoylierungsstellen und der Palmitoylierungsgrad sollen als potentielle Einflußgrößen auf die Sekretionsfähigkeit untersucht韦尔登. SNAP-25-Varianten sollen hierbei in Snap-25-/-- Chromaffinzellen mit Hilfe eines viralen Expressionssystems explorert韦尔登，um die rekonstituierte Sekretion mittels zeitlich hochauflösender elektrophysiologischer Methoden auf Änderungen in den Freisetzungseigenschaften zu analysieren.将荧光标记的SNAP-25-融合蛋白的棕榈酰化产物局部化。

项目成果

v-SNARE transmembrane domains function as catalysts for vesicle fusion

• DOI: 10.7554/elife.17571
• 发表时间: 2016-06-25
• 期刊: ELIFE
• 影响因子: 7.7
• 作者: Dhara, Madhurima;Yarzagaray, Antonio;Bruns, Dieter
• 通讯作者: Bruns, Dieter

The SNAP-25 linker supports fusion intermediates by local lipid interactions

SNAP-25 连接子通过局部脂质相互作用支持融合中间体

• DOI: 10.7554/elife.41720
• 发表时间: 2019
• 期刊: eLife
• 影响因子: 7.7
• 作者: A. Shaaban;M. Dhara;W. Frisch;A. Harb;A. Shaib;U. Bechere r;D. Bruns ;R. Mohrmann
• 通讯作者: R. Mohrmann