Extrachromosomal plasmids and conditionally regulated gene vectors

Genvektoren，die auf viralen Konzepten beruhen，können die stabile Aufrechterhaltung von Transgenen in extrachromosomaler Form in Zielzellen vermitteln.病毒因子可以通过Zelle同步DNA转染和在Tochterzellen中复制质粒的分离来实现。这种方法是以体外生殖器为基础，从体外培养的EB病毒（EBV）质粒中分离出EB病毒。在这个基础上，我们开始了新的衍生物，这是一个新的或新的操作。我们必须更好地理解Faktoren的分子基础，因为质粒和DNA阳离子的稳定性很好。Beide Prozesse - episomale Persistenz und DNA diation- können mit unseren Plasmiden estmals unabhängig von einander untersucht韦尔登，da wir mit Hilfe eines allosterischen Schalters diese Prozesse getrennt ansteern können.我们需要制定一个更好的工作计划，就像我们在韦尔登和welchen Einfluenza epigenetische Veränderung auf diesen Prozess中所做的那样。Mit Hilfe Tetrazyklin-regulierter episomaler Genvektoren韦尔登在体外和体内人异种移植Rag 2/7 c/ Mäusen中对Vektor-transduzierten menschlichen B-Zellen进行了研究。研究重点是在转基因、胚胎发育、表观遗传修饰和生殖支持等方面对转基因动物的变构调节和增殖进行韦尔登。

Genvektoren, die auf viralen Konzepten beruhen, können die stabile Aufrechterhaltung von Transgenen in extrachromosomaler Form in Zielzellen vermitteln. Virale Faktoren sind dabei für eine mit der Zelle synchrone DNA Replikation und die präzise Segregation der replizierten Plasmide in die Tochterzellen essentiell. Dieser Antrag basiert auf episomalen Genvektoren, die vom plasmidalen Replikationsursprung des Epstein-Barr Virus (EBV) abgeleitet sind, der als oriP bezeichnet wird. Auf dieser Grundlage haben wir neuartige Derivate entwickelt, die auf zellulären oder künstlichen Replikationsfaktoren beruhen. Wir möchten hier die molekularen Grundlagen der Faktoren besser verstehen, die für die stabile Aufrechterhaltung dieser Plasmide und ihre DNA Replikation verantwortlich sind. Beide Prozesse - episomale Persistenz und DNA Replikation - können mit unseren Plasmiden erstmals unabhängig von einander untersucht werden, da wir mit Hilfe eines allosterischen Schalters diese Prozesse getrennt ansteuern können. Mit dem vorgeschlagenen Arbeitsplan möchten wir aufdecken, wie und wo diese episomalen Moleküle in Kompartimenten des Zellkern etabliert werden und welchen Einfluß epigenetische Veränderung auf diesen Prozess haben. Mit Hilfe Tetrazyklin-regulierter episomaler Genvektoren werden wir diese Erkenntnisse in Vektor-transduzierten menschlichen B-Zellen in vitro und in vivo in human xenotransplantierten Rag2/7c / Mäusen untersuchen. Der Fokus wird auf der allosterischen Regulation dieser Vektoren in ruhenden und proliferierenden Zellen liegen, wobei Aspekte des Gentransfers, der Etablierung, der epigenetischen Modifikation und der Aufrechterhaltung der Genvektoren besondere Berücksichtigung finden werden.