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Multi-Photonen Laser-Scan/Light Sheet Mikroskop

多光子激光扫描/光片显微镜

基本信息

批准号：
238482468
负责人：
金额：
--
依托单位：
Universitätsklinikum Bonn (UKB)
依托单位国家：
德国
项目类别：
Major Research Instrumentation
财政年份：
2013
资助国家：
德国
起止时间：
2012-12-31 至无数据
项目状态：
未结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/238482468?language=en
关键词：
Multi Photonen Laser Scan Light

项目摘要

Im Rahmen dieses Antrags sollen Untersuchungen der Myelinisierung im zentralen Nervensystem an Zebrafischen in vivo durchgeführt werden. Es ist geplant, transgene Fische zu generieren, die fluoreszierende Reporterproteine exprimieren. Diese Reporter zeigen sowohl den Zustand der Myelinisierung durch Oligodendrozyten an, als auch zelluläre Aktivitäten (z.B. Änderung der intrazellulären Calciumkonzentration) umgebender Zellen. Hierbei handelt es sich z.B. um Neuronen, deren Axone myelinisiert werden, oder um benachbarte "puffernde" und "integrierende" Astroglia. Der Zebrafisch ist für diese Art von in vivo Experimenten als Vertebraten-Modell besonders gut geeignet, da er sich zum einen sehr leicht genetisch manipulieren lässt, und zum anderen durch seine optische Transparenz im Larvenstadium und (bei Albino-Linien) auch im adulten Tier sehr gut mikroskopieren lässt. Dennoch ist für die vorgesehenen mikroskopischen Untersuchungen, die sich zum Teil durch die Fragestellung bedingt über einen längeren Zeitraum erstrecken, ein Multi-Photonen-Mikroskop zwingend notwendig. So wird gewährleistet, dass optisch ausreichend tief in das Gewebe eingedrungen werden kann. Darüber hinaus wird durch die infrarote Anregung der Fisch und die fluoreszierende Probe über einen längeren Untersuchungszeitraum möglichst schonend behandelt. Schließlich ist geplant, zur Visualisierung des Myelins eine erst kürzlich beschriebene markierungsfreie Methode der "Third Harmonic Generation Microscopy" einzusetzen, welche einen Ultrakurzpulslaser voraussetzt. Zusätzlich zur üblichen Punkt-Scanning-Anordnung soll auch eine Anregung mittels eines „Lichtblatts“ ermöglicht werden, was in vielen Experimenten eine weitere Reduktion der Strahlenbelastung der Fische erlaubt.

在韦尔登体内实验中，这些血管瘤可导致中枢神经系统和斑马鱼的骨髓炎。这是一种植物，转基因鱼类，荧光报告蛋白表达。这位报告员指出，通过少突胶质细胞的生长，骨髓细胞也有活力（z.B. Calciumkonzentration）umgebender Zellen。这是我的工作。神经元，髓鞘韦尔登，或“膨胀”和“整合”的星形胶质细胞。Der Zebrafisch ist für diese Art von in vivo Experimenten als Vertebraten-Modell besonders gut geegnet，da er sich zum einen sehr leicht genetisch manipulieren lässt，and zum anderen durch optische erenz im Larvenstadium und（bei Albino-Linien）auch im adulten Tier sehr gut mikroskopieren lässt. Dennoch is für die vorgesehenen mikroskopischen Untersuchungen，die sich zum Teil durch die Fragestellung bedingt über einen längeren Zeitraum erstrecken，ein Multi-Photonen-Mikroskop zwingend notwendig.因此，我们必须确保光学系统能够在韦尔登范围内运行。通过菲施的红外线和荧光探针，我们可以在一个较低的温度下进行测量。这种方法是一种简单的方法，用于骨髓的可视化首先需要一种“三次谐波发生显微镜”的标记方法，然后再使用一种超脉冲激光。Zusätzlich zur üblichen Punkt-Scanning-Anordnung soll auch eine Anregung mittels eines“Lichtblatts”ermöglicht韦尔登韦尔登，was in vielen Experimenten eine weitere Reduktion der Strahlenbelastung der Fische erlaubt.