脂質ナノ粒子工学と染色体工学を融合した遺伝子導入モデルによるCYP3A機能解明

使用脂质纳米颗粒工程和染色体工程相结合的基因转移模型阐明 CYP3A 功能

• 批准号: 21J13116
• 负责人: 峰岸 元気
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J13116/
• 关键词: CYP3A

生体内CYP3A活性の生理的マーカーとして、コレステロール4β位水酸化が挙げられる。従来、血漿中の4β-hydroxy cholesterol（4bHC）およびcholesterol（Chol）のLC-MSを用いた検出は、誘導体化が必要であった。非誘導体の直接分析ができるか検討したところ、4bHCは50-500 ng/mL, Cholは0.2-2 mg/mLの範囲で定量可能であった。CYP3Aヒト化ラットにおいてCYP3A誘導剤を3日間処置すると、血漿中4bHC/Chol比が1.48倍増加した。CYP3A基質薬血中濃度推移に対する影響と比較して小さかったが、これは、4bHCの半減期が60時間と長く、CYP3A誘導の期間が不十分であるためと考えた。今後、より半減期の短いマーカーであるとされる1β-水酸化デオキシコール酸などの解析もおこない、CYP3A mRNA内封ナノ粒子投与による急速なCYP3A活性増加を評価できる即時性マーカーとしての応用を検討したい。CYP3A5遺伝子多型モデルマウスにおける検討もおこなった。CYP3A5*3マウス（非発現型）およびCYP3A5*1マウス（発現型）のゲノムを導入したマウスはいずれも、同程度の4bHC/Cholの値を示した。CYP3A5発現の有無が、CYP3A5基質となる未知の脂質またはコルチコイドなどの血漿中または組織内濃度に影響を与え、コレステロール生成系を変化させている可能性がある。CYP3A5マーカー反応T-5のN-酸化活性をCYP3A5*3およびCYP3A5*1マウスにおいて比較した。CYP3A5*1マウスはCYP3A5*3マウスよりも肝および小腸ミクロソームにおいて高い活性を示した。今後、T-5を用いて、血中N-酸化体がマウス in vivo CYP3A5活性マーカーとなるかを検討したい。

The activity of CYP3A in the body is related to the physiological <s:1> カ と と と と て て て て て が挙げられる が挙げられる が挙げられる water acidification が挙げられる at the 4β site. Youdaoplaceholder0 to obtain <s:1> 4β-hydroxy cholesterol (4bHC) およびcholesterol (Chol) and <s:1> LC-MS in plasma を to induce and body induction が is necessary であった. Not directly analysis induced body の が で き る か beg し 検 た と こ ろ, 4 BHC は 50-500 ng/mL, Chol, 0.2 2 mg/mL の は van 囲 で quantitative may で あ っ た. CYP3A ヒ ト change ラ ッ ト に お い て CYP3A induction tonic を 3 day 処 both す る と, 4 BHC in plasma/Chol, 1.48 times than が rights and し た. CYP3A matrix 薬 blood concentration on に す seaborne る effect と し て small さ か っ た が, こ れ は, 4 BHC の half life が 60 と long く and CYP3A induction period の が not very で あ る た め と exam え た. Short in the future, よ り half life の い マ ー カ ー で あ る と さ れ る 1 beta water acidification デ オ キ シ コ ー ル acid な ど の parsing も お こ な い and CYP3A mRNA photosensitive ナ ノ particle cast and に よ る rapid な CYP3A activity raised を evaluation requirement by 価 で き る immediacy マ ー カ ー と し て の 応 with を beg し 検 た い. CYP3A5 has 伝 subtype polymorphisms モデ お ウスにおける検 ウスにおける検 ウスにおける検 to ask for お お なった なった. CYP3A5 * 3 マ ウ ス (non 発 now) お よ び CYP3A5 * 1 マ ウ ス (発 now type) の ゲ ノ ム を import し た マ ウ ス は い ず れ も, with level 4 BHC の / Chol の numerical を shown し た. CYP3A5 発 is の が, CYP3A5 matrix と な unknown の lipid ま る た は コ ル チ コ イ ド な ど の ま in plasma た は に concentration in organization を and え コ レ ス テ ロ ー ル generating system を variations change さ せ て い る possibility が あ る. CYP3A5 マ ー カ ー anti 応 T - 5 の N - acidification active を CYP3A5 * 3 お よ び CYP3A5 * 1 マ ウ ス に お い て compare し た. CYP3A5 * 1 マ ウ ス は CYP3A5 * 3 マ ウ ス よ り も liver お よ び small intestine ミ ク ロ ソ ー ム に お い て high い activity を shown し た. In the future, T - 5 を い て, blood of N - acidification が マ ウ ス in vivo CYP3A5 active マ ー カ ー と な る か を beg し 検 た い.

项目成果

Pharmacokinetic analysis of tacrolimus in CYP3A-humanized mice carrying human CYP3A5*1 allele.

他克莫司在携带人 CYP3A5*1 等位基因的 CYP3A 人源化小鼠中的药代动力学分析。

• 发表时间: 2021
• 作者: Genki Minegishi;Yasuhiro Kazuki;Hidetaka Akita; Kaoru Kobayashi
• 通讯作者: Kaoru Kobayashi