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ハイパーラマン分光法によるタンパク質二次構造研究の新展開

超拉曼光谱研究蛋白质二级结构的新进展

基本信息

批准号：
21K04975
负责人：
奥野将成
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

当初の計画通りモデルペプチド水溶液を用いて、ハイパーラマン（HR）分光法による二次構造の判別可能性について研究を行った。水溶液のpHおよび温度を制御することにより、ペプチドの二次構造をα-ヘリックス、β-シート、ランダムコイルに調整したポリ-L-リシン（PLL）およびポリ-L-グルタミン酸（PLGA）を測定し、HR分光法により二次構造の判別が可能であるという結論を得ることができた。HRスペクトルにおいて、アミドI、II、III、およびCαH変角振動のピーク位置およびバンド幅が二次構造により異なることを初めて見出した。得られたHRスペクトルを可視励起ラマンスペクトルおよび既報の紫外共鳴ラマンスペクトル、既報の赤外吸収スペクトルと比較し、HRスペクトルの特徴を抽出した。本研究で使用した515 nm励起HR分光では、紫外共鳴ラマンスペクトルと似通ったスペクトルパターンが得られた。これは、HR信号においてアミド結合のπ-π*遷移への二光子共鳴効果が支配的であることを意味している。一方、赤外・可視励起ラマンスペクトルとは全く異なった信号パターンを示し、HR分光法がこれらの分光法と相補的な手法として利用できることを示唆している。さらに、アミドIバンドのピーク位置が赤外・ラマンスペクトルにおけるピーク位置よりも優位に高波数に観測されることを発見した。これは、おおきな双極子モーメントを持つアミドIバンドにおけるノンコインシデンス効果の結果であると解釈を行った。この結果はHR分光法では赤外・ラマン分光法とは異なるスペクトル情報を得られることを意味している。

The initial plan was to study the possibility of discrimination of secondary structures by means of IR spectroscopy. The pH of aqueous solution is controlled by temperature. The secondary structure of α-, β-, and α-L-(PLL) can be determined by HR spectroscopy. The secondary structure can be distinguished by IR spectroscopy. HR is the first time that angular vibration occurs in the secondary structure. In this paper, the characteristics of HR selection are extracted by visible excitation, UV resonance, IR absorption and comparison. In this study, HR spectroscopy using 515 nm excitation was used. The two-photon resonance effect of the π-π * transition in the HR signal is dominated by the π-π * transition. The method of using IR spectroscopy to complement IR spectroscopy is described in detail below. This is the first time that we've seen a high wavenumber measurement at a high wavenumber. The results of this experiment are as follows: The results of HR spectroscopy are different from those of IR spectroscopy.