Development of a Lipidomics Platform for Analysis of Lipid Metabolism in Intracellular Symbiosis

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生体内には数万種を超える脂質分子が存在すると推定されている。細胞内共生成立過程における生体膜脂質の果たす役割と機能を調べようとするとき、詳細な脂質プロファイルデータを取得・解析することができれば、それらを手掛かりに重要な働きを担う因子を探索することができる。近年急速に発達してきた高速液体クロマトグラフィ－タンデム質量分析法(LC/MS/MS)は、高感度な分析法として注目を集めており、生体試料中の脂質成分を一斉に検出可能な先端的なリピドミクス技術の一つとして、生体中の脂質プロファイリングや挙動の解析、化合物同定への適用例も多く報告されてきている。現在、この先端的リピドミクス解析技術を新たにミドリゾウリムシとクロレラの細胞内共生成立過程における脂質プロファイル解析に適合するように網羅性と解析データの質の向上を目指して分析条件の調整を進めている。これまでに最適化した脂質一斉分析システムを利用して、異なる細胞から抽出した全脂質試料から取得される脂質プロファイルデータのディファレンシャル解析を実施し、挙動に変化のある脂質成分の探索が可能かを検証した。検証試料として機能未知のアシルトランスフェラーゼ様タンパク質を欠損したラン藻細胞を用い、その代謝生成物を解析したところ、欠損株で消失する脂質成分を見出すことに成功した。さらに、見出された変動脂質成分について、高分解能質量分析システムを用いた精密質量分析により分子構造を解析した結果、同成分を同定することもできた。今後、細胞内共生成立過程における詳細な脂質プロファイルをリピドミクス分析により経時的に追跡し、共生過程において変動する脂質の探索・同定およびその定量的な評価へと解析を進めていく。