食用種子アレルギーに対する2Sアルブミンファミリー一斉分析法の確立

食用种子过敏2S白蛋白家族同步分析方法的建立

• 批准号: 21K05496
• 负责人: 吉光 真人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05496/
• 关键词: 2Sアルブミン; 食用種子; アレルゲン; LC-MS/MS; ペプチド; 消化; 2Sアルブミンファミリー; アレルゲンコンポーネント; 一斉分析

近年、豊富な栄養成分を含む、くるみやカシューナッツ、大豆等の食用種子は、健康志向の高まりからその消費量が増加している。これに伴い、食用種子を原因とした即時型食物アレルギーの患者数が増加しており、その対策のひとつとして、最近、アレルギー表示が義務付けられた品目（特定原材料）にくるみが追加された。食用種子アレルギーの発症予防には、アレルゲン摂取量の制御が重要であり、日々の食事において非意図的なアレルゲンの混入を防止しなければならない。アレルギーの原因となるアレルゲンが複数存在する食用種子に対して、その混入を防止するためには、複数のアレルゲンを同時分析可能な、効率的で信頼性の高い分析法が必要となるが、現在までにその報告例は少ない。本研究で取り組む分析法は、タンパクであるアレルゲンを酵素消化し、生じたペプチドを機器（LC-MS/MS）で測定する手法である。本年度は、2Sアルブミンファミリー（2S-AF）である大豆アレルゲンGly m 8に着目した。分析対象となるペプチドを選定し、その分析条件を最適化した。また、豆類、野菜類、果物類の実試料を用いて、選定したGly m 8由来ペプチドのクロマトグラムピークに妨害がないことを確認し、ペプチドの特異性を確認した。同様の手法を用いて、入手した4種類のアレルゲン標準品：クルミJug r 1、ピーナッツAra h 2、カシューナッツAna o 3、ごまSes i 1について、前年度に引き続き、分析条件の最適化を検討した。今後は、これらの分析条件を同時分析に向けて統合し、分析法の確立を目指す。

近年来，由于健康意识的增加，含有丰富营养含量的核桃，腰果和大豆等食用种子的消费量一直在增加。结果，由食用种子引起的立即食物过敏的患者数量在增加，并且作为对策之一，核桃已被添加到最近已授权标记过敏的项目（特定成分）中。控制过敏原的摄入对于防止可食用种子过敏的发作很重要，并且必须在日常饮食中预防意外过敏原污染。为了防止具有多种过敏原的可食用种子的污染，这是一种有效且可靠的分析方法，允许同时分析多种过敏原，但迄今为止，有报道的病例很少。这项研究中采用的分析方法是酶消化过敏原，即蛋白质，并使用仪器（LC-MS/MS）测量所得肽。今年，我们专注于大豆过敏Gly M 8，即2S白蛋白家族（2S-AF）。选择要分析的肽并优化了分析条件。此外，使用豆类，蔬菜和水果的果实样品，我们确认在选定的Gly M 8衍生肽的色谱峰中没有干扰，并证实了肽的特异性。使用相同的方法，我们研究了获得的四种标准过敏原的分析条件的优化：核桃罐R 1，花生Ara H 2，腰果ana O 3和芝麻SES I 1，如上一年。将来，我们旨在整合这些分析条件以同时进行分析并建立分析方法。