Sorting mechanism of processing enzymes to the secretory granules.

加工酶对分泌颗粒的分选机制。

• 批准号: 21K06070
• 负责人: 穂坂 正博
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Akita Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06070/
• 关键词: 分泌顆粒; ペプチドホルモン; 選別輸送; プロセッシング酵素; グラニンタンパク質

内分泌細胞の分泌顆粒でペプチドホルモン前駆体は、分泌顆粒膜上に集積する様々な活性化酵素によって切断・修飾され生理活性のあるホルモンに成熟する。しかし、ホルモン前駆体と活性化酵素群がともに分泌顆粒に選別輸送される分子機構については未だ解明されていない。そこで、本研究では、分泌顆粒基質のセクレトグラニン II および III（Sg2、Sg3）に着目し、これらの分子がこのホルモン前駆体と活性化酵素群の共輸送過程で果たす役割を、Sg2-、Sg3-欠損 (KO) マウスを活用して生化学的手法で検討する。本研究課題では、内分泌細胞株およびSg2やSg3の遺伝子欠損マウスを活用して、具体的に以下の3点を明らかにする。A. Sg3がホルモン活性化酵素を分泌顆粒に選択的に集積させる仕組みの解明：これまで申請者が進めてきたSg3の生化学的解析を発展・深化させ、Sg3と各ホルモン活性化酵素との直接的相互作用の検証や結合ドメインの同定、Sg3と結合する新規分子の網羅的探索を行い、ペプチドホルモン前駆体に活性化酵素群を集積・近接させる分子機構を明らかにする。B. Sg2がホルモン活性化酵素を分泌顆粒に選択的に集積させる仕組みの解明：Sg3/CgA系とは独立して分泌顆粒形成に寄与するSg2がどのようにホルモン活性化酵素群を分泌顆粒に集積させ機能させるかについて、上記Aと同様に生化学的手法で明らかにする。C. Sg2にもSg3にも依存しないホルモン活性化機構の有無の検証：上記AとBの解析結果を踏まえて、ペプチドホルモン活性化過程でSg2とSg3の2つのグラニンが必須かどうかを、Sg2/Sg3-DKOマウスを作出・解析して明らかにする。

Secretory granules of endocrine cells accumulate on the probodies and secretory granule membranes, and activate enzymes to cut off and modify physiological activities. The active enzyme group is secreted by the molecular mechanism of selective transport. In this study, we investigated the application of biochemical methods to the co-transport of active enzyme groups and molecular precursors in the secretion of granular substrates (SG2, SG3). The topic of this research is to make full use of the genetic defects of endocrine cell lines and Sg2 and Sg3. The following three points are specific. A. Sg3-activated enzyme secretion particles selected from the collection of the following components: The applicant has further developed and deepened the biochemical analysis of Sg3, Sg3 and various active enzymes, and has demonstrated the direct interaction between Sg3 and active enzymes. The identification and binding of Sg3 and active enzymes have been explored. The molecular mechanism of active enzymes has been clarified. B. Sg2-CgA system is independent of secretory granule formation. Sg2-CgA system is independent of secretory granule formation. Sg3-CgA system is independent of secretory granule formation. Sg2-CgA system is independent of secretory granule formation. Sg3-CgA system is independent of secretory granule formation. Sg2-CgA system is independent of secretory granule formation. C. Sg2, Sg3, Sg3, Sg2, Sg3, Sg3, Sg2, Sg3, Sg

项目成果

内分泌細胞の高コレステロール組成分泌顆粒膜に結合するタンパク質群の探索

寻找与内分泌细胞高胆固醇分泌颗粒膜结合的蛋白质

• 发表时间: 2021
• 作者: 安達美喜;渡部剛;穂坂正博
• 通讯作者: 穂坂正博

Researchmap

研究地图

副腎でセクレトグラニン3が果たす機能をを調べる

研究肾上腺中分泌粒素 3 的功能

• 发表时间: 2021
• 作者: 岸本 拓磨;田中 一馬;第94回日本生化学会大会
• 通讯作者: 第94回日本生化学会大会

秋田県立大学 生物資源科学部 応用生物科学科 動物機能グループ 分子生命科学分野（穂坂研究室）

秋田县立大学生物资源学部应用生物科学系动物机能研究组分子生命科学部（保坂研究室）

Differential Expression of Secretogranins II and III in Canine Adrenal Chromaffin Cells and Pheochromocytomas

• DOI: 10.1369/00221554221091000
• 发表时间: 2022-04-09
• 期刊: JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY & CYTOCHEMISTRY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Gomi，Hiroshi;Nagumo，Takahiro;Hosaka，Masahiro
• 通讯作者: Hosaka，Masahiro