The importance of NGLY1 on the chemoresistance of triple negative breast cancer

トリプルネガティブ乳がん（TNBC）細胞株を用いて、NGLY1の発現量の違いが、TNBC細胞の薬剤耐性にどのような影響をもたらすかの解析に取り組んだ。昨年度までに、内在性のNGLY1発現量の違いがTNBC細胞の薬剤耐性に影響をもたらすこと、同一細胞内でのNGLY1のノックダウンも同様にTNBC細胞の薬剤耐性に影響をもたらすこと、を明らかにした。今年度は、そのメカニズム解明に取り組んだ。昨年度の結果により、NGLY1の細胞周期への影響が示唆されていたが、専門家との議論をもとに、細胞周期を調べる方法の再検討が必要とわかったため、その再検討を行った。再検討した手法により、コントロールとして用いたHeLa細胞の野生型とNGLY1-KOでは、確かにNGLY1欠損が細胞周期に影響を与えることが確認できたが、TNBC細胞ではコントロールと同一の条件では細胞周期の制御ができず、TNBC細胞においてNGLY1の発現量が細胞周期に影響するという明確な結果が得られなかった。そのため、他の可能性を探るべく、TNBC細胞においてNGLY1のノックダウン前後で変化する遺伝子発現の解析に取り組んだ（トランスクリプトーム解析）。データ量が膨大なため、完全には解析を終えられていないが、細胞周期よりも細胞分化や発生に関する遺伝子変化の方が影響を受けていることがわかった。TNBC細胞の薬剤耐性獲得の関連分子として知られているDNA修復に関する遺伝子の有意な変化も確認された。当初予想していたNGLY1と機能的関連性が示されているFBS2やNFE2L1が関与するプロテオスタシスに関連するような遺伝子の有意な発現変化は見られなかった。

トリプルネガティブ乳がん（TNBC）細胞株を用いて、NGLY1の発現量の違いが、TNBC細胞の薬剤耐性にどのような影響をもたらすかの解析に取り組んだ。昨年度までに、内在性のNGLY1発現量の違いがTNBC細胞の薬剤耐性に影響をもたらすこと、同一細胞内でのNGLY1のノックダウンも同様にTNBC細胞の薬剤耐性に影響をもたらすこと、を明らかにした。今年度は、そのメカニズム解明に取り組んだ。昨年度の結果により、NGLY1の細胞周期への影響が示唆されていたが、専門家との議論をもとに、細胞周期を調べる方法の再検討が必要とわかったため、その再検討を行った。再検討した手法により、コントロールとして用いたHeLa細胞の野生型とNGLY1-KOでは、確かにNGLY1欠損が細胞周期に影響を与えることが確認できたが、TNBC細胞ではコントロールと同一の条件では細胞周期の制御ができず、TNBC細胞においてNGLY1の発現量が細胞周期に影響するという明確な結果が得られなかった。そのため、他の可能性を探るべく、TNBC細胞においてNGLY1のノックダウン前後で変化する遺伝子発現の解析に取り組んだ（トランスクリプトーム解析）。データ量が膨大なため、完全には解析を終えられていないが、細胞周期よりも細胞分化や発生に関する遺伝子変化の方が影響を受けていることがわかった。TNBC細胞の薬剤耐性獲得の関連分子として知られているDNA修復に関する遺伝子の有意な変化も確認された。当初予想していたNGLY1と機能的関連性が示されているFBS2やNFE2L1が関与するプロテオスタシスに関連するような遺伝子の有意な発現変化は見られなかった。