減数分裂期のDNA修復機構におけるMcmdc2の機能の解明

減数分裂期の染色体分配には、組換えによる二本鎖DNA切断（DSB）修復が生む相同染色体の交叉が必須であるが、その制御機構には未知の部分が多い。ゼブラフィッシュ減数分裂変異体imoの原因遺伝子として見つかったmcmdc2遺伝子は、ショウジョウバエとマウスの先行研究から減数分裂期のDSB修復に機能する新規因子であることが示唆されているが、その細胞内局在や分子機構は未知である。マウスとは異なり、ゼブラフィッシュ変異体では卵母細胞が減数分裂を超えて発達するため、他の減数分裂因子への影響を解析しやすい。昨年度、ENU変異体のimo変異体とmcmdc2ノックアウトゼブラフィッシュとの相補性テストを行い、imo変異体の表現型がmcmdc2の変異によるものであることを確認した。そして、imo変異体の精母細胞に対してヒストンH2AXや減数分裂特異的recombinaseであるDmc1、DNAミスマッチ修復タンパク質のMsh5 (mutS homolog 5)の解析を行い、組換え中間体のプロセシングに異常があることが見えてきた。本年度は、mcmdc2変異体の精母細胞に加えて卵母細胞の表現型解析を進めるとともに、Mcmdc2と協働して組換えに関わると考えられるMcm8の変異体の作製を進めた。

減数分裂期の染色体分配には、組換えによる二本鎖DNA切断（DSB）修復が生む相同染色体の交叉が必須であるが、その制御機構には未知の部分が多い。ゼブラフィッシュ減数分裂変異体imoの原因遺伝子として見つかったmcmdc2遺伝子は、ショウジョウバエとマウスの先行研究から減数分裂期のDSB修復に機能する新規因子であることが示唆されているが、その細胞内局在や分子機構は未知である。マウスとは異なり、ゼブラフィッシュ変異体では卵母細胞が減数分裂を超えて発達するため、他の減数分裂因子への影響を解析しやすい。昨年度、ENU変異体のimo変異体とmcmdc2ノックアウトゼブラフィッシュとの相補性テストを行い、imo変異体の表現型がmcmdc2の変異によるものであることを確認した。そして、imo変異体の精母細胞に対してヒストンH2AXや減数分裂特異的recombinaseであるDmc1、DNAミスマッチ修復タンパク質のMsh5 (mutS homolog 5)の解析を行い、組換え中間体のプロセシングに異常があることが見えてきた。本年度は、mcmdc2変異体の精母細胞に加えて卵母細胞の表現型解析を進めるとともに、Mcmdc2と協働して組換えに関わると考えられるMcm8の変異体の作製を進めた。