一次繊毛を介して組織発生を制御する新規リン酸化酵素DYRK2の標的分子解明

阐明新型磷酸化酶 DYRK2 的靶分子，该酶通过初级纤毛控制组织发育

• 批准号: 21K06192
• 负责人: 吉田 彩舟
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06192/
• 关键词: 一次繊毛; hedgehog; DYRK2; 発生; 翻訳後修飾; Hedgehog; リン酸化酵素

本研究は、哺乳類における新規の発生制御因子として機能同定したリン酸化酵素Dual specificity tyrosine phosphorylation-regulated kinase 2 (DYRK2)に関 し、その分子機序の解明を目的とする。特に哺乳類の細胞に1本だけ存在する細胞小器官「一次繊毛」の機能制御におけるDYRK2のリン酸化基質を同定し、組織発生ならびに発がんにおけるDYRK2の機能解析を目指す。本年度は、DYRK2の相互作用分子の同定を目指した。我々が作出したノックアウトマウスから樹立したマウス胎仔線維芽細胞(MEF)ならびにCRISPR-Cas9で作出したDYRK2欠損細胞を用いた網羅的遺伝子発現解析(RNA-seq)・リン酸化基質探索 (リン酸化プロテオミクス)、ならびに、相互作用分子探索 (近位依存性ビオチン標識系(BioID))を実施し、マルチオミックス的に解析した。その結果、複数の相互作用分子ならびにリン酸化基質の候補タンパク質を同定した。特に、一次繊毛の制御に関与する可能性の分子群、ならびに、組織発生に重要なシグナル系に関与する分子群の同定に成功した。また、それら候補因子に関し、リン酸化サイトの変異を導入したコンストラクトや作出したリン酸化特異抗体を用いて、詳細な分子機序解析を展開した。現在、候補分子に関し、CRISPR-Cas9システムによるノックアウト細胞の樹立、変異タンパク質を用いたリン酸化サイト・相互作用領域の同定を試みている。

In this study, both mammalian and mammalian animals were able to determine the molecular sequence of the acidifying enzyme Dual specificity tyrosine phosphorylation-regulated kinase 2 (DYRK2) in the same way as the biological control factors. Special mammalian cells 1 in this paper, there are many small organs in mammalian cells. The machine can control the acidification of DYRK2 cells in the same way, and the tissue can analyze the target of DYRK2. This year, DYRK2 interacting molecules are the same as each other. We do not know how to do this. We do not know how to use the sub-analysis of the Internet (RNA-seq), acidification base exploration (acidification), interaction molecule exploration (proximity dependence marker tag system (BioID)), interaction molecule exploration (proximity dependence marker system (BioID)). I don't know what to say about the resolution of this question. The results show that the complex number of interacting molecules is similar to that of the acidified base. The molecular group of possibility, the molecular group of possibility, the important molecular group of tissue and the molecular group of primary and secondary agents are the same as those of the molecular group. The molecular sequence analysis was performed by means of molecular sequence analysis and molecular sequence analysis. At present, we are waiting for the molecular structure, the CRISPR-Cas9 concentration, the concentration of the cell, the acidification mechanism, the interaction domain and the interaction domain.

项目成果

ラット下垂体中葉側のMarginal Cell LayerにおけるTetraspanin 1の発現

四跨膜蛋白1在大鼠垂体内侧叶侧边缘细胞层的表达

• 发表时间: 2022
• 作者: 堀口幸太郎;藤原 研;塚田岳大;中倉 敬;吉田彩舟;長谷川瑠美;瀧上 周
• 通讯作者: 瀧上 周

ラット下垂体中葉側Marginal Cell LayerにおけるCD9/CD81/S100β/SOX2陽性細胞の機能

大鼠垂体内侧边缘细胞层CD9/CD81/S100β/SOX2阳性细胞的功能

• 发表时间: 2021
• 作者: 堀口幸太郎;藤原 研;塚田岳大;中倉 敬;吉田彩舟;長谷川瑠美;瀧上 周
• 通讯作者: 瀧上 周

一次繊毛を介し組織発生を制御するCMGCキナーゼ

CMGC 激酶通过初级纤毛控制组织发育

• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Japanese Biochemical Society
• 作者: Yuko S. Niwa and Ryusuke Niwa;吉田 彩舟，吉田 清嗣
• 通讯作者: 吉田 彩舟，吉田 清嗣

DYRK2 maintains genome stability via neddylation of cullins in response to DNA damage

DYRK2 通过 cullin 的 neddylation 来响应 DNA 损伤，维持基因组稳定性

• DOI: 10.1242/jcs.259514
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Cell Science
• 影响因子: 4
• 作者: Kawamura Akira;Yoshida Saishu;Aoki Katsuhiko;Shimoyama Yuya;Yamada Kohji;Yoshida Kiyotsugu
• 通讯作者: Yoshida Kiyotsugu

妊娠、泌乳期におけるラット下垂体前葉内プロラクチン産生細胞の増殖機構の解明

妊娠期和哺乳期大鼠垂体前叶催乳素产生细胞增殖机制的阐明

• 发表时间: 2021
• 作者: 堀口幸太郎;藤原 研;塚田岳大;中倉 敬;吉田彩舟;長谷川瑠美;瀧上 周
• 通讯作者: 瀧上 周